[发明专利]无质粒、无诱导剂使用的产D-泛酸基因工程菌及构建方法有效
| 申请号： | 202110512009.0 | 申请日： | 2021-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN113278569B | 公开（公告）日： | 2022-04-19 |
| 发明（设计）人： | 柳志强;张博;陈力;金洁漪;李波;王培;郑裕国 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/53;C12N15/54;C12N15/31;C12N15/113;C12P13/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 浙江千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人： | 冷红梅 |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种高产D‑泛酸的基因工程菌、构建方法，及其在微生物发酵制备D‑泛酸中的应用。本发明通过对大肠杆菌的有机酸合成途径相关基因进行了阻断，减少有机酸的副作用及增加丙酮酸池的积累，加强丙酮酸合成途径基因pykA，加强丙酮酸积累，解除关键酶的负反馈抑制，解决D‑泛酸合成的瓶颈步骤，改善糖摄取能力，增加了前体丙酮酸的积累，过表达基因lpd、ilvD改善主路合成途径基因的表达情况，最终获得更高产D‑泛酸工程菌，无需质粒引入外源酶增强关键酶酶活，摇瓶发酵产量达到3.99g/L；敲除阻遏蛋白编码基因lacI后形成组成型表达，并进行培养基优化后，摇瓶发酵产量达到4.72g/L；在5L发酵罐中分批补料发酵，产量达到34.28g/L。 | ||
| 搜索关键词： | 质粒 诱导剂 使用 泛酸 基因工程 构建 方法 | ||
【主权项】：
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