[发明专利]一种改进的纯化可溶性果蝇TRP离子通道蛋白的方法在审

专利信息
申请号: 202110331296.5 申请日: 2021-03-29
公开(公告)号: CN115124609A 公开(公告)日: 2022-09-30
发明(设计)人: 刘伟;陈伟荻;刘宇扬;刘佳;陈倩苟;蒋日婷 申请(专利权)人: 深圳北京大学香港科技大学医学中心
主分类号: C07K14/435 分类号: C07K14/435;C07K1/14;C07K1/16;C07K1/22
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 518036 广东省深*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种改进的纯化可溶性果蝇TRP离子通道蛋白的方法。本发明方法是通过培养w[1118]品系的野生型果蝇,借由分离得到的果蝇头部,在含有十二烷基‑β‑D‑麦芽糖苷(N‑Dodecyl‑β‑D‑maltoside,DDM)去垢剂的缓冲液中,以6xNORPA863‑1095蛋白为诱饵,对INAD蛋白复合物进行亲和纯化,然后用PGEX‑4T‑1载体表达GST‑TRP‑CT 1260‑1275蛋白进行竞争性洗脱,得到可溶性的TRP离子通道蛋白,最后使用凝胶层析得到电泳单一条带的果蝇TRP离子通道蛋白。使用本方法将使得果蝇TRP蛋白可以通过野生型果蝇直接表达,大大降低了使用昆虫细胞纯化蛋白的生产成本和生产难度。
搜索关键词: 一种 改进 纯化 可溶性 果蝇 trp 离子 通道 蛋白 方法
【主权项】:
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