[发明专利]一种无抗性标记自主发光肺炎克雷伯菌的构建方法及应用在审

专利信息
申请号: 202011246711.9 申请日: 2020-11-10
公开(公告)号: CN112342229A 公开(公告)日: 2021-02-09
发明(设计)人: 张天宇;田茜溶;高亚敏;王帅;余崴;方翠婷;张静然 申请(专利权)人: 中国科学院广州生物医药与健康研究院
主分类号: C12N15/63 分类号: C12N15/63;C12N15/65;C12N15/66;C12N1/21;C12R1/22
代理公司: 广州长星专利商标代理事务所(普通合伙) 44662 代理人: 梁桂萍
地址: 510000 广东省广*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明涉及基因工程技术领域,尤指一种无抗性标记自主发光肺炎克雷伯菌的构建方法及应用,由转移质粒pTXR和辅助质粒pUCTns构建;方法包括以下:S1、准备转移质粒和辅助质粒;S2、将表达转座酶基因的辅助质粒转入肺炎克雷伯菌感受态细胞中,涂于卡那霉素抗性的LB培养基平板;S3、将含辅助质粒的肺炎克雷伯菌制备成感受态,然后将转移质粒转入含辅助质粒的肺炎克雷伯菌感受态细胞中,涂于APR抗性的LB培养基平板,得到自主发光的肺炎克雷伯菌;本发明的构建方法无需人工表达外源解离酶,操作简便快捷,本发明构建的SfAlKp,不需要添加任何底物即可发出强光;且本发明的SfAlKp没有抗性基因,可避免由于抗性基因导致的交叉耐药对药物筛选、评价可能带来的潜在副作用。
搜索关键词: 一种 抗性 标记 自主 发光 肺炎 克雷伯菌 构建 方法 应用
【主权项】:
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