[发明专利]一种糖蛋白MUC16原位稳定过表达方法在审
申请号: | 202011044887.6 | 申请日: | 2020-09-28 |
公开(公告)号: | CN112143757A | 公开(公告)日: | 2020-12-29 |
发明(设计)人: | 陈颖;李光剑;丁晓洁;杨震林;郭威;孙远;宁明杰 | 申请(专利权)人: | 云南省肿瘤医院(昆明医科大学第三附属医院) |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C07K14/47 |
代理公司: | 昆明合盛知识产权代理事务所(普通合伙) 53210 | 代理人: | 龙燕 |
地址: | 650000 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明公开一种糖蛋白MUC16原位稳定过表达方法,属于生物医药技术领域。本发明所述方法利用MUC16特异性的sgRNA定位dCas9到基因组DNA上MUC16基因的启动子区,通过dCas9融合的VP64结合MS2‑P65‑HSF1,在定位点最大程度募集转录起始复合体,有效实现MUC16基因的原位转录激活;慢病毒系统能够把过表达的所需元件(MUC16‑sgRNA,dCAS‑VP64,MS2‑P65‑HSF1)整合到细胞的基因组DNA中,跟随细胞分裂复制,实现细胞株MUC16的稳定过表达;本发明实现了常规载体难以克隆的大分子糖蛋白MUC16的原位稳定过表达。 | ||
搜索关键词: | 一种 糖蛋白 muc16 原位 稳定 表达 方法 | ||
【主权项】:
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