[发明专利]亚胺甲基四氢叶酸环化脱氢酶截短蛋白及其制备方法,应用有效

专利信息
申请号: 202010301678.9 申请日: 2020-04-16
公开(公告)号: CN111471672B 公开(公告)日: 2022-03-18
发明(设计)人: 秦枫;潘敬梅;黄敬双;张伟;万文琴;鲜静;吴斌;张小飞;周玥;颜松 申请(专利权)人: 四川携光生物技术有限公司
主分类号: C12N9/88 分类号: C12N9/88;C12N15/60;C12N15/81;C12N1/19;G01N33/573;G01N33/576;G01N33/68;C12R1/84
代理公司: 成都顶峰专利事务所(普通合伙) 51224 代理人: 李通
地址: 610000 四川省成都市高新*** 国省代码: 四川;51
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摘要: 发明公开了一种亚胺甲基四氢叶酸环化脱氢酶截短蛋白的制备方法,包括以下步骤:去除亚胺甲基四氢叶酸环化脱氢酶的mRNA序列N端的543个碱基,根据营养组成型酵母的密码子偏好性进行截短基因序列的设计,在截短基因的上游端加入EcoRI内切酶位点且在其下游去掉终止密码子后加入XbaI内切酶位点,将质粒和FTCD‑C截短基因分别采用EcoRI和XbaI双酶切后采用连接酶进行过夜连接,诱变且对诱变产物进行培养、筛选,获得序列正确的重组质粒且转化进入营养组成型酵母中,进行抗性筛选,提取克隆子基因组验证,获得目的菌株;优化表达条件;纯化;该FTCD‑C截短蛋白在体外缓冲液中稳定性好,抗原抗体反应亲和力高。
搜索关键词: 亚胺 甲基 叶酸 环化 脱氢酶 蛋白 及其 制备 方法 应用
【主权项】:
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