[发明专利]亚胺甲基四氢叶酸环化脱氢酶截短蛋白及其制备方法,应用有效
申请号: | 202010301678.9 | 申请日: | 2020-04-16 |
公开(公告)号: | CN111471672B | 公开(公告)日: | 2022-03-18 |
发明(设计)人: | 秦枫;潘敬梅;黄敬双;张伟;万文琴;鲜静;吴斌;张小飞;周玥;颜松 | 申请(专利权)人: | 四川携光生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/81;C12N1/19;G01N33/573;G01N33/576;G01N33/68;C12R1/84 |
代理公司: | 成都顶峰专利事务所(普通合伙) 51224 | 代理人: | 李通 |
地址: | 610000 四川省成都市高新*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开了一种亚胺甲基四氢叶酸环化脱氢酶截短蛋白的制备方法,包括以下步骤:去除亚胺甲基四氢叶酸环化脱氢酶的mRNA序列N端的543个碱基,根据营养组成型酵母的密码子偏好性进行截短基因序列的设计,在截短基因的上游端加入EcoRI内切酶位点且在其下游去掉终止密码子后加入XbaI内切酶位点,将质粒和FTCD‑C截短基因分别采用EcoRI和XbaI双酶切后采用连接酶进行过夜连接,诱变且对诱变产物进行培养、筛选,获得序列正确的重组质粒且转化进入营养组成型酵母中,进行抗性筛选,提取克隆子基因组验证,获得目的菌株;优化表达条件;纯化;该FTCD‑C截短蛋白在体外缓冲液中稳定性好,抗原抗体反应亲和力高。 | ||
搜索关键词: | 亚胺 甲基 叶酸 环化 脱氢酶 蛋白 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
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