[发明专利]通用型CAR-T细胞、其制备方法及其应用在审
申请号: | 201911407988.2 | 申请日: | 2019-12-31 |
公开(公告)号: | CN110951695A | 公开(公告)日: | 2020-04-03 |
发明(设计)人: | 姜舒;张芸;熊斌;王冰;纪惜銮 | 申请(专利权)人: | 深圳市茵冠生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/867;A61K39/00;A61P35/00;C12R1/91 |
代理公司: | 深圳市博锐专利事务所 44275 | 代理人: | 汪黎 |
地址: | 518000 广东省深圳市南山区西丽*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种通用型CAR‑T细胞、其制备方法及其应用,该通用型CAR‑T细胞的制备方法,包括以下步骤:(1)利用扩增引物P1‑P5分别对pCDH、3gRNA、EF1α、GPC3 CAR‑1和GPC3 CAR‑2片段进行PCR扩增,然后将获得的扩增片段依次进行连接;采用引物P6对连接产物进行PCR扩增,将扩增产物进行电泳鉴定,鉴定正确后转化至感受态细胞;构建获得pLenti‑3gRNA‑EF1α‑GPC3 CAR重组慢病毒质粒,包装病毒颗粒;(2)感染扩增后的T淋巴细胞,通过电转化导入Cas9 mRNA,获得所述通用型CAR‑T细胞。本发明具有免疫排斥反应低、肿瘤细胞杀伤效率高的优点。 | ||
搜索关键词: | 通用型 car 细胞 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
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