[发明专利]一种通过共表达血红蛋白来提高毕赤酵母工程菌中α-半乳糖苷酶组成型表达量的方法

摘要

本发明涉及通过共表达血红蛋白来提高毕赤酵母工程菌中α‑半乳糖苷酶组成型表达量的方法，可有效解决提高毕赤酵母工程菌中α‑半乳糖苷酶组成型表达量及其应用的问题，方法是，构建表达质粒pGAPZαA‑GalA；构建组成型表达α‑半乳糖苷酶的毕赤酵母工程菌出发菌株，用DNA限制性内切酶BamHⅠ酶切基因片段PVT以及毕赤酵母表达载体pPIC9K，之后用T4 DNA连接酶将PVT连接进载体pPIC9K中，形成共表达质粒pPIC9K‑PVT；将出发菌株制作成感受态细胞，将共表达质粒pPIC9K‑PVT电转化至其中，涂布在MD平板上培养筛选阳性克隆，得到共表达毕赤酵母工程菌株；本发明制备方法简单，新颖独特，易操作，表达效果好。