[发明专利]一种农杆菌介导的长春花瞬时转化方法有效
申请号: | 201911137591.6 | 申请日: | 2019-11-19 |
公开(公告)号: | CN110699376B | 公开(公告)日: | 2022-11-15 |
发明(设计)人: | 于放;赵信池 | 申请(专利权)人: | 大连工业大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82 |
代理公司: | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人: | 周莹;李馨 |
地址: | 116034 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及一种农杆菌介导的长春花瞬时转化方法,是一种提高农杆菌瞬时转化的辅助侵染方法。本发明方法为在农杆菌侵染前以纤维素酶溶液浸泡长春花根、茎切口进行预处理,处理后采用真空渗透法对长春花进行侵染,纤维素酶溶液浓度为810‑1080U/mL,纤维素酶溶液pH为5.6‑5.8,溶液温度27‑29℃,浸泡4‑6h。本发明方法显著提高了长春花根、茎的农杆菌侵染率,进而提高目的基因的转化效率,解决了农杆菌难以侵染长春花根、茎的问题,RNA提取及反转录后PCR验证,可检测到目的基因条带,证明目的基因成功转化。 | ||
搜索关键词: | 一种 杆菌 长春花 瞬时 转化 方法 | ||
【主权项】:
1.一种农杆菌介导的长春花瞬时转化方法,其特征在于,所述方法在农杆菌侵染前以纤维素酶溶液浸泡长春花根、茎切口;所述纤维素酶溶液浓度为810-1080U/mL。/n
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