[发明专利]一种赤瓟花叶病毒的多克隆抗体制备及ELISA检测方法在审
申请号: | 201911017609.9 | 申请日: | 2019-10-24 |
公开(公告)号: | CN110845606A | 公开(公告)日: | 2020-02-28 |
发明(设计)人: | 赵娜;赵敏;崔岱宗;苗艳梅;王宁;王珏玉;杨悦;韦庆慧 | 申请(专利权)人: | 东北林业大学 |
主分类号: | C07K16/10 | 分类号: | C07K16/10;C07K16/06;C07K14/08;C07K1/22;C12N15/40;C12N15/70;G01N33/569 |
代理公司: | 大庆知文知识产权代理有限公司 23115 | 代理人: | 方博 |
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摘要: | 一种赤瓟花叶病毒的多克隆抗体制备及ELISA检测方法,所述制备方法包括如下步骤:以赤瓟花叶病毒核酸基因组RNA为模板,基于赤瓟花叶病毒保守CP蛋白核苷酸序列,采用引物ThDMV‑CP1和ThDMV‑CP2进行RT‑PCR扩增,扩增产物经纯化后连接于pET‑30a(+)表达载体上,并对CP蛋白进行表达和纯化,将纯化蛋白与弗氏佐剂混合免疫兔子,采集兔子血液,经亲和层析纯化获得赤瓟花叶病毒多克隆抗体。本发明利用ThDMV病毒制备出相应的特异性多克隆抗体,并建立了具有高特异性和灵敏性的相应的间接ELISA检测病毒方法,具有操作方便、灵敏度高、特异性强、成本低等优势,同时适于大批量样品检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 花叶 病毒 克隆 抗体 制备 elisa 检测 方法 | ||
【主权项】:
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