[发明专利]一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法在审
| 申请号： | 201910890657.2 | 申请日： | 2019-09-20 |
| 公开（公告）号： | CN110564666A | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 李妍;胡竹林;孔蕾;刘海;戴敏 | 申请（专利权）人： | 李妍 |
| 主分类号： | C12N3/00 | 分类号： | C12N3/00;C12N1/14;C12Q1/04;C12R1/77 |
| 代理公司： | 50244 重庆项乾光宇专利代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 高姜 |
| 地址： | 650031 *** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法，包括如下步骤：镰刀菌培养、镰刀菌孢子制备、实验分组及镰刀菌型角膜炎造模、镰刀菌型角膜炎模型的培养分析及镰刀菌型角膜炎的观察。本发明采用树鼩的眼作为实验眼，并进行镰刀菌型角膜炎模型的构建以及分析观察，进而使得通过本发明能够实现对镰刀菌型角膜炎模型的构建以及及时有效的观察分析，即使得本发明有利于进行推广应用。 | ||
| 搜索关键词： | 镰刀菌 角膜炎模型 构建 角膜炎 观察 分析 镰刀菌孢子 实验眼 制备 分组 | ||
【主权项】：
1.一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、镰刀菌培养：/n对接种环采用酒精灯加热灭菌，待接种环冷却后，使用接种环刮取适量的镰刀菌菌种，并接种到沙保氏葡萄糖琼脂培养基中，将接种后的培养基置于26℃普通培养箱中培养7d-14d；/nS2、镰刀菌孢子制备：/nS2.1、对接种环采用酒精灯加热灭菌，待接种环冷却后，使用接种环刮取步骤S1中培养基内培养后的所有菌丝至装有5ml生理盐水的离心管内；/nS2.2、使用移液器吸取生理盐水5mL反复冲洗步骤S1中培养基内培养后的菌丝表面，即获得真菌混悬液，将真菌混悬液收集至步骤S2.1中的离心管内，即获得真菌混合液；/nS2.3、取新的离心管一根，并在离心管的管口放入高压蒸汽灭菌的玻璃漏斗，漏斗内放置无菌脱脂纱布；/nS2.4、将步骤S2.2中的真菌混合液倒入步骤S2.3中的漏斗内，在无菌脱脂纱布的过滤下进行过滤菌丝并获得孢子混悬液；/nS2.5、将步骤S2.4获得的孢子混悬液放置在血细胞计数板上，并调整血细胞计数板上的孢子混悬液的孢子数量为1×10
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