[发明专利]一种提高烟草DNA沉淀效率的提取方法及其应用有效
| 申请号： | 201910778244.5 | 申请日： | 2019-08-22 |
| 公开（公告）号： | CN110452905B | 公开（公告）日： | 2023-06-02 |
| 发明（设计）人： | 白戈;谢贺;杨大海;李永平;姚恒;张谊寒;肖炳光;童治军 | 申请（专利权）人： | 云南省烟草农业科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 昆明大百科专利事务所 53106 | 代理人： | 李云 |
| 地址： | 650021*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 一种提高烟草DNA沉淀效率的提取方法及其应用，包括前处理和提取，前处理是将待检烟草材料进行浸泡、烘干、取样和研磨得到前处理材料a；提取是在前处理材料a中加入前处理材料体积2～3倍的TPS提取缓冲液，于温度70～80℃下静置30～50min，然后离心得到上清液b，加入上清液b等体积的异丙醇，混匀，离心去除上清液得到沉淀c，沉淀c中加入乙醇溶液震荡，然后离心去除乙醇，风干底部的沉淀得到沉淀d，沉淀d加溶剂溶解，得到DNA提取样本。本发明形成了一套稳定、完整、可行、提取难度低、提取的DNA质量高且对环境友好的DNA提取方法，可应用于卷烟材料、烤后烟叶和烟草鲜叶DNA提取工艺中。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 烟草 dna 沉淀 效率 提取 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种提高烟草DNA沉淀效率的提取方法，其特征在于，包括前处理和提取步骤，具体包括：/nA、前处理：将待检烟草材料进行浸泡、烘干、取样和研磨得到前处理材料a；/nB、提取：在前处理材料a中加入前处理材料体积2～3倍的TPS提取缓冲液，于温度70～80℃下静置30～50min，然后离心得到上清液b，加入上清液b等体积的异丙醇，混匀，离心去除上清液得到沉淀c，沉淀c中加入体积百分浓度70～80％的乙醇溶液，震荡2～3min，然后离心去除乙醇，风干底部的沉淀得到沉淀d，沉淀d加溶剂溶解，得到DNA提取样本。/n
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