[发明专利]一种甘草渣指纹图谱检测方法

摘要

本发明提供了一种甘草渣指纹图谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：对照样品预处理，待测甘草渣样品预处理，对照样品和待测甘草渣样品检测，建立对照指纹图谱，待测甘草渣样品指纹图谱分析，参比样品制备，参比样品色谱图，对照样品主要成分分析，待测甘草渣样品主要成分分析，待测甘草渣样品质量判定。本发明的有益效果在于：本发明提供的一种甘草渣指纹图谱检测方法具有以下优势：发明提供的一种甘草渣指纹图谱检测方法具有特征的指纹特性，获得了甘草渣中所含化合物的色谱条件，建立了指纹档案，且此方法简便、稳定、精密度高、重现性好，能有效表征甘草渣的质量，有利用于监控产品的质量。

主权项

1.一种甘草渣指纹图谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对照样品预处理：取对照甘草渣样品充分粉碎、过80目筛得到对照甘草渣粉，取所述对照甘草渣粉适量，加23倍量的75‑80％乙醇间歇超声浸提，之后用75‑80％乙醇补足损失溶液量，摇匀，用0.2μm微孔滤膜滤过，得到对照样品溶液；所述间歇超声浸提的具体方法为，首先在功率50W、频率45kHz条件下超声3mim，快速冷却，然后在功率60W、频率55kHz条件下超声5mim，冷却至室温；(2)待测甘草渣样品预处理：取待测甘草渣样品充分粉碎、过80目筛得到待测甘草渣粉，取所述待测甘草渣粉适量，加23倍量的75‑80％乙醇间歇超声浸提，之后用75‑80％乙醇补足损失溶液量，摇匀，用0.2μm微孔滤膜滤过，得到待测甘草渣样品溶液；所述间歇超声浸提的具体方法为，首先在功率50W、频率45kHz条件下超声3mim，快速冷却，然后在功率60W、频率55kHz条件下超声5mim，冷却至室温；(3)对照样品和待测甘草渣样品检测：分别精密吸取所述对照样品溶液与所述待测甘草渣样品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪进行检测，并记录100min内的色谱图，得到对照样品色谱图和待测甘草渣样品色谱图；所述高效液相色谱仪检测条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充相；检测波长：335‑340nm；流动相：以乙腈为流动相A，以冰醋酸溶液为流动相B；梯度洗脱程序如下：流速：1.2‑1.5mL/min；柱温：26‑28℃；(4)建立对照指纹图谱：所述对照样品色谱图即为对照指纹图谱，所述对照指纹图谱包括11个特征峰，且所述特征峰的相对保留时间分别为：峰1：0.117±0.005；峰2：0.517±0.005；峰3：0.638±0.005；峰4：0.655±0.005；峰5：0.707±0.005；峰6：0.793±0.005；峰7：0.965±0.005；峰8：1.00±0.005；峰9：1.052±0.005；峰10：1.241±0.005；11：1.259±0.005；(5)待测甘草渣样品指纹图谱分析：所述待测甘草渣样品色谱图即为待测甘草渣样品指纹图谱，将所述待测甘草渣样品指纹图谱与所述对照指纹图谱进行比对，利用指纹图谱软件计算相似度，确定相似度数值；(6)参比样品制备：取甘草查尔酮A、甘草苷、甘草酸及芒柄花素对照品适量，加23倍量的75‑80％乙醇制成混合溶液作为参比样品溶液；(7)参比样品色谱图：精密吸取参比样品溶液10μL，注入高效液相色谱仪按照步骤(3)中所述高效液相色谱仪的检测条件进行检测，并记录100min内的色谱图，得到参比样品色谱图；(8)对照样品主要成分分析：将对照样品指纹图谱与参比样品色谱图进行比对，确定对照样品中取甘草查尔酮A、甘草苷、甘草酸及芒柄花素的含量；(9)待测甘草渣样品主要成分分析：将待测甘草渣样品指纹图谱与参比样品色谱图进行比对，确定待测甘草渣样品中取甘草查尔酮A、甘草苷、甘草酸及芒柄花素成分含量；(10)待测甘草渣样品质量判定：当待测甘草渣样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度数值大于0.85，且待测甘草渣样品与对照样品各主要成分的偏差都控制在5％以内，所述待测甘草渣样品为合格样品。