[发明专利]定量联合检测C-反应蛋白与血清淀粉样蛋白A的时间分辨免疫层析试纸条及其制备方法在审
| 申请号： | 201910641543.4 | 申请日： | 2019-07-16 |
| 公开（公告）号： | CN110244060A | 公开（公告）日： | 2019-09-17 |
| 发明（设计）人： | 刘佳佳;邵伟;王丽君 | 申请（专利权）人： | 苏州遵道生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/58;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/531 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 姚炜炜 |
| 地址： | 215000 江苏省苏州市苏州*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明揭示了一种定量检测C‑反应蛋白与血清淀粉样蛋白A的试纸条的制备方法，包括：将硝酸纤维素膜包被检测线与质控线，检测线分别使用CRP和SAA包被抗体，质控线分别使用CRP和SAA捕获抗体的二抗；制备结合垫，其包括：离心洗涤捕获抗体，将纳米增强型时间分辨荧光微球与CRP捕获抗体溶解于PBS，加入EDC室温反应30min‑12h；加入封闭液封闭30min‑12小时；离心后PBS洗涤沉淀，使用微球稀释液稀释后定量喷涂到第一载体；其中，捕获抗体为CRP捕获抗体和SAA捕获抗体；还包括制备样品垫，包括将第二载体浸泡于含有0.9％NaCl和0.5‑3％的表面活性剂S9的水溶液中，然后烘干。 | ||
| 搜索关键词： | 捕获抗体 制备 血清淀粉样蛋白A 检测线 质控线 微球 时间分辨免疫 时间分辨荧光 硝酸纤维素膜 表面活性剂 层析试纸条 包被抗体 定量检测 定量喷涂 反应蛋白 离心洗涤 联合检测 纳米增强 室温反应 载体浸泡 封闭液 结合垫 试纸条 稀释液 样品垫 烘干 包被 二抗 稀释 沉淀 溶解 封闭 | ||
【主权项】：
1.定量检测C‑反应蛋白与血清淀粉样蛋白A的时间分辨免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，所述方法包括，将硝酸纤维素膜包被检测线与质控线，所述检测线分别使用CRP和SAA包被抗体，所述质控线分别使用CRP和SAA捕获抗体的二抗；还包括制备结合垫，其包括：使用洗涤液离心洗涤捕获抗体，所述洗涤液为硼酸缓冲液；纳米增强型时间分辨荧光微球与捕获抗体溶解于PH6‑8、浓度0.05mol/L的PBS，加入EDC使终浓度为10mg/ml，室温反应30min‑12h；加入封闭液封闭30min‑12h，所述封闭液含有0.1‑1％F68、10‑50mmol/ml甘氨酸；离心后PBS洗涤沉淀，使用微球稀释液稀释到30‑120倍，所述微球稀释液为PBS溶液，所述PBS溶液含有1‑3％吐温20及20％海藻糖或蔗糖；将稀释的微球定量喷涂到第一载体；还包括制备样品垫，其包括将第二载体浸泡于含有0.9％NaCl和0.5‑3％表面活性剂S9的水溶液中，然后烘干；其中，所述捕获抗体分别为CRP捕获抗体和SAA捕获抗体；所述百分比浓度为质量百分比。
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