[发明专利]一种利用胚拯救获得杨树杂交苗的方法

摘要

本发明涉及一种利用胚拯救获得杨树杂交苗的方法，包括采集花枝、插条及培养、授粉和胚拯救等步骤，胚拯救方法：外植体消毒后，将种子置于胚拯救培养基上培养7‑14d，再按长出幼苗和没长出幼苗分两步进行：将长出的幼苗转移到生根培养基上培养，得到无菌苗，长大后移植即得杂交苗；如没长出幼苗，将种子诱导出愈伤组织，用芽分化培养基诱导出芽，最后转生根培养基上培养，得到无菌苗，长大后移植，得到杂交苗。本发明采用胚拯救的方法，对未发育完全的种子进行组织培养，可获得大量杂交苗，方法简单，节省了杨树的育种时间，避免了资源浪费，有效克服了杨树的传统水培法过程中存在的种子败育导致的杂交失败的问题，特别适合于美洲黑杨的水培。

主权项

1.一种利用胚拯救获得杨树杂交苗的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)采集花枝：采集花枝在2月上旬进行，取长度100‑300cm，直径大于5cm的无病虫害、花芽饱满的杨树枝条；(2)插条及培养：将雌雄花枝分开置于20‑30℃的温室水培，每天换一次水；(3)授粉：待雄花开后开始收集花粉，将花粉置于干燥器中干燥，然后4℃低温保存，当雌花开放，柱头打开时，即进行授粉，将花粉涂到柱头上，持续授粉三天，每天2‑3次；(4)胚拯救：A.若授粉后三周内出现败育的情况，对外植体消毒后，将未发育完全的子房，放置在子房生长培养基上培养10‑14d后，剥出种子进行胚拯救；B.若授粉后三周后才出现败育的情况，取下发黑的、未成熟的蒴果，清洗并消毒后，剥出种子，直接进行胚拯救；所述胚拯救的方法是：将种子置于胚拯救培养基上进行组织培养，培养7‑14d后，按长出幼苗和没长出幼苗分两步进行：1)长出幼苗：将长出的幼苗转移到生根培养基上进行培养，得到无菌苗，无菌苗长大后移植，得到杂交苗；2)没长出幼苗：将在胚拯救培养基上培养14d没长出幼苗的种子用愈伤诱导培养基诱导出愈伤组织，然后用芽分化培养基诱导出芽，最后转生根培养基上进行培养，得到无菌苗，无菌苗长大后移植，得到杂交苗。