[发明专利]用于大鼠肝细胞分离的肝脏灌流方法及其灌流装置在审
| 申请号： | 201910486527.2 | 申请日： | 2019-06-05 |
| 公开（公告）号： | CN110283778A | 公开（公告）日： | 2019-09-27 |
| 发明（设计）人： | 黄振威;周艳 | 申请（专利权）人： | 广州市冠流生物医学科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12M1/00;C12M1/36;C12M1/34;A61D7/00 |
| 代理公司： | 东莞市神州众达专利商标事务所(普通合伙) 44251 | 代理人： | 陈世洪 |
| 地址： | 510000 广东省广州市高新技术产业开发区科学城*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于动物肝脏灌流分离肝细胞技术领域，具体涉及用于大鼠肝细胞分离的肝脏灌流方法及其灌流装置，该方法根据经典的两步灌注法的原理设计，但在第二步酶液灌流时实时监测大鼠肝脏的重量变化，并在合适时机时自动控制灌流过程停止，灌流装置包括称重平台、灌流系统和数据处理系统，所述灌流系统包括通过输液管依次连接的缓冲液罐、蠕动泵、恒温器、气泡收集器和穿刺针，所述称重平台电性连接数据处理系统，称重平台上放置有大鼠肝脏。本发明提供了一种可以持续监测灌流过程中肝脏重量变化的灌流装置，可自动在合适时机停止灌流，从而显著提高肝脏灌流后分离获得的肝细胞的活性和数量，具有显著的实质性特点。 | ||
| 搜索关键词： | 灌流 灌流装置 称重平台 肝脏灌流 数据处理系统 大鼠肝细胞 大鼠肝脏 灌流系统 合适时机 重量变化 分离肝细胞 气泡收集器 实质性特点 持续监测 电性连接 动物肝脏 过程停止 缓冲液罐 实时监测 依次连接 原理设计 穿刺针 肝细胞 恒温器 蠕动泵 输液管 酶液 灌注 肝脏 | ||
【主权项】：
1.用于大鼠肝细胞分离的肝脏灌流方法，其特征在于，包括以下步骤：(i)用无钙离子缓冲液灌流大鼠肝脏，以破坏器官的细胞连接；(ii)用酶缓冲液灌流大鼠肝脏，同时使用称重装置对酶缓冲液灌流期间的大鼠肝脏的重量进行持续测定，当大鼠肝脏的重量增加率在预定持续时间内小于或等于预定阀值标准时，停止缓冲液的输送；(iii)将大鼠肝脏移至平皿中，加入基础培养液；(iv)去除大鼠肝脏的包膜等结缔组织，过滤后获得细胞悬液。
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