[发明专利]一种高水溶性的cgta酶及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201910404458.6 | 申请日： | 2019-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN110195043A | 公开（公告）日： | 2019-09-03 |
| 发明（设计）人： | 王鹏;杨广宇 | 申请（专利权）人： | 武汉格莱利生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/00 | 分类号： | C12N9/00 |
| 代理公司： | 湖北天领艾匹律师事务所 42252 | 代理人： | 程明 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖新*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及高分子酶技术领域，尤其是一种高水溶性的cgta酶的制备方法，包括反应物酶的获取、反应催化剂的选择、反应的发生、cgta酶与催化剂的分离、cgta酶的活性检测以及cgta酶的储存。本发明cgta酶主要用于神经节苷脂类寡糖的体外酶法合成中，本发明能够采用CjCgtA作为反应的催化剂，不经能够对反应速度的提升，同时也提高了cgta酶的纯度以及活性。 | ||
| 搜索关键词： | 高水溶性 催化剂 制备方法和应用 神经节苷脂类 反应催化剂 活性检测 反应物 体外酶 寡糖 制备 合成 储存 | ||
【主权项】：
1.一种高水溶性的cgta酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、反应物酶的获取；S2、反应催化剂的选择：采用CjCgtA作为该反应的催化剂；S3、反应的发生，反应的具体操作步骤如下：M1、在S1中的反应柱载体的底部粘接分布着多个均匀筛孔的滤膜，在反应柱载体的底部卡设圆形筛板，从而通过筛板将滤膜进行固定；M2、将S2中准备的催化剂缓慢的倒入反应柱载体的上端，使得催化剂溶液在重力的作用下进入反应柱载体的内部，实现与β‑1‑4‑N乙酰半乳糖氨基转移酶充分的接触；M3、将培养皿进行水浴加热，温度控制在22‑24摄氏度，反应液的PH控制在7.5‑8.5之间，静置3‑4小时，同时每小时利用PH检测计对反应液的PH进行检测；S4、cgta酶与催化剂的分离；S5、cgta酶的活性检测；S6、cgta酶的储存。
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