[发明专利]一种登革病毒IgG/IgM抗体检测试纸条、试剂盒及其制备方法

摘要

本发明公开了一种登革病毒IgG/IgM抗体检测试纸条、试剂盒及其制备方法，涉及登革病毒检测技术领域。本发明公开的登革病毒IgG/IgM抗体检测试纸条，包括依次贴于聚氯乙烯底部上的样品垫、包被了胶体金标记的登革病毒重组抗原和鸡Ig Y多抗的免疫结合垫、包被了登革病毒抗人IgM抗体、IgG抗体的检测线和抗鸡IgY多抗的质控线的硝酸纤维素膜和吸水纸；该试纸条可通过检测标记物的方法检测待检样品中是否存在登革病毒IgG/IgM抗体；该试纸条和包括有该试纸条的检测卡可作为登革病毒早期急性感染抗原检测的的补充，覆盖病程的中后期，减少漏检的风险。

主权项

1.一种登革病毒IgG/IgM抗体检测试纸条的制备方法,其特征在于,包括以下步骤：a.用氯化金溶液和柠檬酸三钠溶液制备胶体金溶液；b.碳酸钾调节步骤a得到的胶体金溶液的pH至6.5‑9.0，依次加入登革病毒重组抗原、牛血清白蛋白溶液，离心得到沉淀，重悬液重悬沉淀得到胶体金标记的登革病毒重组抗原溶液；c.碳酸钾调节步骤a得到的胶体金溶液的pH至6.5‑8.0，依次加入鸡IgY抗原、牛血清白蛋白溶液，离心得到沉淀，重悬液重悬沉淀得到胶体金标记的鸡IgY抗原溶液；d. 用结合垫处理液均匀喷涂在结合垫上进行预处理，预处理结束后用步骤b和c得到的胶体金标记的登革病毒重组抗原溶液和胶体金标记的鸡IgY抗原溶液的混合溶液对结合垫喷金得到免疫结合垫,喷金结束后将免疫结合垫置于室温，湿度≤30%条件下干燥1小时，然后在0.1Mpa条件下真空干燥1小时；e.用包被缓冲液稀释抗人IgM抗体得到检测线T1工作液；用包被缓冲液稀释抗人IgG抗体得到检测线T2工作液；用包被缓冲液稀释抗鸡IgY多抗得到质控线工作液；用检测线T1工作液、检测线T2工作液和质控线工作液分别在贴于37℃‑60℃干燥箱中干燥24小时；f.用样品垫处理液均匀喷涂在样品垫上进行预处理；g.将样品垫和免疫结合垫贴于划膜的硝酸纤维素膜下方，将吸水纸贴于划膜的硝酸纤维素膜的上方得到登革病毒IgG/IgM抗体检测试纸条。