[发明专利]一种能够分布于脑内细胞间隙的硫酸软骨素修饰的氧化铁纳米粒子的制备方法

摘要

本发明公开了一种能够分布于脑内细胞间隙的硫酸软骨素修饰的氧化铁纳米粒子的制备方法。因生物医学领域的一些特殊应用要求氧化铁纳米粒子能够分布于细胞膜附近，故本发明采用物理方法将硫酸软骨素修饰于氧化铁纳米粒子表面后注入大鼠脑内，利用硫酸软骨素属于细胞外基质的功能及特点，再加之合适的电泳粒度及zeta电位，使得修饰了硫酸软骨素的氧化铁纳米粒子极少被脑内细胞内吞，且大部分呈分散状填充在细胞间隙中。

主权项

1.一种能够分布于脑内细胞间隙的硫酸软骨素(CS)修饰的氧化铁纳米粒子的制备方法，其特征在于具体步骤为：(1)称取15g聚乙二醇PEG和0.3g聚乙烯亚胺PEI于三口烧瓶中，在氩气气氛中于280℃回流1h，产物依次用甲苯和丙酮清洗三次，并用磁选柱清洗残留的甲苯丙酮，所得样品分散于去离子水中，即得到聚乙烯亚胺和聚乙二醇共同修饰的氧化铁纳米粒子PEG/PEI‑SPIONs；(2)将10～40mg CS分别与20ml浓度为1mg/ml的步骤(1)合成的PEG/PEI‑SPIONs的水分散液混合，即CS与PEG/PEI‑SPIONs的重量比在1：2到2：1之间，在温度为4℃，转速为60r/min的摇床中反应5h，反应后的样品置于4℃，12h，然后样品在透析袋中透析120h，即得到CS‑SPIONs，样品保存于4℃；(3)用25μl微量进样器(0.57mm内径)抽取5μl浓度为2mg/ml的CS‑SPIONs样品，在大鼠立体定位仪辅助下，采用微量进样器缓慢地将样品注入SD大鼠左侧黑质部位，大鼠黑质部位组织取样经固定、包埋、切片后用透射电镜观察氧化铁纳米粒子在脑组织内的分布，CS‑SPIONs大部分填充在细胞间隙中，且未发生团聚现象；所述步骤(1)中的聚乙二醇为聚乙二醇1000、聚乙二醇2000、聚乙二醇3000和聚乙二醇4000中的一种，聚乙烯亚胺为聚乙烯亚胺600、聚乙烯亚胺1800、聚乙烯亚胺3000和聚乙烯亚胺4000中的一种。