[发明专利]一种半胱氨酸单细胞生物传感器的构建及应用在审
| 申请号： | 201910318357.7 | 申请日： | 2019-04-19 |
| 公开（公告）号： | CN110283764A | 公开（公告）日： | 2019-09-27 |
| 发明（设计）人： | 刘君;刘川;徐宁 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12Q1/02;C12N15/01;G01N21/64;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 300308 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种检测L‑半胱氨酸生物传感器的制备方法，以及在该生物传感器在检测大肠杆菌L‑半胱氨酸产量中的应用。该生物传感器主要元件包括，来源于菠萝泛菌中转录调控基因CcdR编码基因及其启动子区和终止子区、来源于菠萝泛菌中基因ccdA的启动子区、绿色荧光蛋白编码基因eGFP和质粒骨架pTrc‑Mob。该生物传感器可在0～32mmol L‑1 L‑半胱氨酸浓度下表现良好的线性关系，在0.01～8mmol L‑1 L‑半胱氨酸浓度下，荧光强度值与半胱氨酸浓度线性关系最高。与高通量筛选体系相结合，利用该生物传感器对大肠杆菌L‑半胱氨酸产量进行实时检测，并能够筛选出L‑半胱氨酸高产突变体，以及L‑半胱氨酸生物合成途径关键酶的突变体。本发明可实现对L‑半胱氨酸的特异性定量实时检测，且灵敏度高。 | ||
| 搜索关键词： | 半胱氨酸 生物传感器 大肠杆菌 编码基因 菠萝泛菌 启动子区 实时检测 突变体 高通量筛选体系 绿色荧光蛋白 浓度线性关系 生物合成途径 单细胞生物 特异性定量 调控基因 线性关系 质粒骨架 终止子区 灵敏度 传感器 关键酶 种检测 荧光 构建 制备 应用 高产 筛选 基因 检测 表现 | ||
【主权项】：
1.一种L‑半胱氨酸单细胞生物传感器，其特征在于：包括转录调控因子CcdR编码基因及其启动子区和终止子区、基因ccdA启动子区、绿色荧光蛋白编码基因eGFP和质粒骨架。
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