[发明专利]一种干细胞体外诱导培育视网膜神经节细胞的方法在审

专利信息
申请号: 201910314210.0 申请日: 2019-04-18
公开(公告)号: CN110157658A 公开(公告)日: 2019-08-23
发明(设计)人: 陈忠平 申请(专利权)人: 朗姿赛尔生物科技(广州)有限公司
主分类号: C12N5/071 分类号: C12N5/071;C12N5/079;C07D493/20
代理公司: 广州一锐专利代理有限公司 44369 代理人: 杨昕昕
地址: 510000 广东省广*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明涉及干细胞领域,提供一种干细胞体外诱导培育视网膜神经节细胞的方法,用于解决视网膜神经的修复问题。本发明提供的一种干细胞体外诱导培育视网膜神经节细胞的方法,包括:S11.取自体干细胞制成单细胞悬液;S12.将单细胞悬液计数后用分化培养基将其稀释成10‑5~10‑3cells/mL的干细胞悬液,接种到培养皿中,获取拟胚体;S13.将拟胚体增殖后转移到诱导分化培养基中,在37℃、5%CO2、饱和湿度下进行干预分化培养。自体干细胞分化形成的视网膜神经节细胞可用于视觉神经损伤后恢复视网膜神经节细胞的数目和功能,不仅有助于减缓视神经损伤病人病情的恶化,促进患者视觉功能的恢复,也必将促进损伤视神经结构和功能的重建。
搜索关键词: 视网膜神经节细胞 诱导 单细胞悬液 自体干细胞 拟胚体 培养皿 视神经 损伤 培育 诱导分化培养基 分化培养基 干细胞悬液 视神经损伤 视网膜神经 病人病情 分化培养 患者视觉 视觉神经 干细胞 可用 稀释 增殖 接种 恢复 饱和 分化 修复 干预 重建 恶化
【主权项】:
1.一种干细胞体外诱导培育视网膜神经节细胞的方法,其特征在于,包括:S11.取自体干细胞制成单细胞悬液;S12.将单细胞悬液计数后用分化培养基将其稀释成10‑5~103cells/mL的干细胞悬液,接种到培养皿中,获取拟胚体;S13.将拟胚体增殖后转移到诱导分化培养基中,在37℃、5%CO2、饱和湿度下进行干预分化培养,所述诱导分化培养基为:每mL含有bFGF 10ng、BDNF 20ng、CNTF 20ng、N2supplement 1ng、非必须氨基酸1ng、肝素2μg,余量为DMEM/F12培养基,所述DMEM/F12培养基是由DMEM培养基和F12培养基按照体积比1:1混合而成。
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