[发明专利]一种污水地下渗滤系统微生物代谢产物检测方法

摘要

本发明的一种污水地下渗滤系统微生物代谢产物检测方法，包括以下工艺步骤：1)土壤样品灭活后，样品加入相应量色谱级提取剂；2)相应温度下超声或超声与离心结合进行提取，提取完样品离心后取上清液，重复上述操作三次；3)合并上清液，干燥，采用提取剂复溶，高速离心得样品液，采用UPLC－MS技术，并控制相应的色谱质谱过程，对样品液进行检测，完成检测分析。本发明的污水地下渗滤系统微生物代谢产物检测方法对促进地下渗滤系统代谢组学研究、建立统一的提取方法具有重要意义，并且过程操作简单、快捷，检测效率高，灵敏性强，获得代谢物峰数据较大，且对样品重现性较好。实现地下渗滤系统代谢组学样品的快速、高效、精准检测。

主权项

1.一种污水地下渗滤系统微生物代谢产物检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，样品液提取：(1)土壤样品采集：在SWIS中采集土壤样品；(2)样品灭活：将土壤样品进行灭活处理；(3)按配比为，灭活后样品∶色谱级提取剂＝1∶(2～3)，单位为g∶ml或ml∶ml，所述的灭活后样品为固体状或液体状，当为固体时，以质量计，当为液体时，以体积计，向灭活后样品中加入色谱级提取剂，进行提取，提取方式采用以下方式中的一种：(a)超声提取，超声温度为20～25℃，提取时间为10～25min，取上清液，重复超声提取操作三次；(b)超声与离心相结合提取，具体为：20～25℃下超声提取5～15min后，将提取样品离心5～15min，取上清液，并重复该超声与离心操作三次，其中，所述的离心转速为2000rmp，离心温度为20～25℃；(4)合并上清液，进行干燥去除水分，形成样品粉末，采用提取剂复溶，搅拌混合均匀后，13000rmp条件下离心5～10min，取上清液，即为样品液，取样品液于进样小瓶的内衬管中进样，进行检测；步骤2，样品液检测：采用UPLC‑MS技术对样品液进行检测，具体过程为：(1)进行色谱分离：具体色谱分离参数为：对样品液进行洗脱，流动相为单一组分或混合组分，流速为0.1～0.3mL/min，并保证流速不变，色谱柱温度为25～35℃，洗脱时间为59～75min，其中：当为单一组分时，流动相为100％水或100％乙腈，当为混合组分时，包括流动相A和流动相B，流动相A为水，流动相B为乙腈；(2)质谱检测分析：色谱分离后进行离子扫描，毛细管电压为1～5KV，干燥气温度150～200℃，干燥气流量4～8L/min，辅助气压力1.0～3.0Bar，质荷比采集范围：50～1800m/z，获得总离子流图，完成污水地下渗滤系统微生物代谢产物检测，其中：所述的离子扫描采用的离子源采用大气压离子源、基质辅助激光解析电离源或快原子轰击源中的一种。