[发明专利]一种青钱柳药材的谱鉴别方法

摘要

本发明公开了一种青钱柳药材的谱鉴别方法，包括如下步骤：（1）采用显微法初步鉴定青钱柳药材；（2）采用薄层色谱法鉴别青钱柳药材活性成分金丝桃苷和异槲皮苷，进行青钱柳的确认判断方法；（3）采用先碳化热解，再用ICP‑MS验证青钱柳的鉴定结果。本发明能够实现高效、准确地鉴别青钱柳药材，弥补了青钱柳药材显微鉴别的空白，结合薄层色谱法再鉴定，创新的采用先碳化热解，再用ICP‑MS验证的方法对青钱柳的鉴定结果验证，对提高和加强青钱柳药材的质量控制、保证产品质量具有重大意义；同时对临床用药的有效性与安全性具有重要指导意义。

主权项

1.一种青钱柳药材的鉴别方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将未粉碎的待检青钱柳药材1g用二甲基亚砜浸泡1~3小时，再取出用FAA标准液固定，‑5~0℃冷冻干燥以后，分别制成表面涂片和横切面涂片以后，依次置于电子显微镜下观测；如表面涂片能清晰观察到：上表皮不见气孔，下表皮见不定式气孔；上表皮细胞和下表皮细胞形状相似，均呈不规则状；同时，横切面涂片能够清晰观察到：下表皮着生有鳞片、单细胞非腺毛和腺毛；叶脉处表皮内方且具厚角组织；栅栏组织与海绵组织分化明显；叶脉中的维管束为外韧型；可初步判断为青钱柳药材；（2）采用薄层色谱法鉴别活性成分金丝桃苷和异槲皮苷，包括如下步骤：（a）取青钱柳待检药材1g，研细，添加80%甲醇50ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；（b）取青钱柳对照药材1g，研细，添加80%甲醇50ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；（c）取金丝桃苷、异槲皮苷对照品适量，分别加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；（d）照《中国药典》2015年版四部通则0502薄层色谱法试验，分别吸取上述供试品溶液、对照药材溶液和对照品溶液各2μl，然后分别点于同一硅胶G薄层板上，加入展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，105℃加热至斑点清晰，置紫外灯365nm下检视；如供试品色谱在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，可确认判断为青钱柳药材；（3）将待检青钱柳药材生片切制均匀，然后将切片的青钱柳生片进行碳化热解处理，依次采用110~120℃油浴焖制1~2小时，转入炒锅100~110℃翻炒1~2小时，降温至90~100℃翻炒1~2小时，转入瓷瓶密闭冷却；取冷却后的青钱柳生片1g，加入8~10ml硝酸冷消化20~30分钟，再加入0.1ml 500μg/L的金标准溶液，然后进行微波消解处理；微波消解程序如下：15min将温度平稳升到180℃，然后在该温度维持20min进行消化，消化完全后冷却到50℃左右，再置于赶酸炉中赶酸到剩余1ml左右，把消解样品转移到25或50ml容量瓶中，用超纯水定容，进行ICP‑MS检测；如ICP‑MS检测到硒含量为0.187~0.189μg/g，可验证判断为青钱柳药材。