[发明专利]一种青钱柳药材的谱鉴别方法

说明书

本发明公开了一种青钱柳药材的谱鉴别方法，包括如下步骤：（1）采用显微法初步鉴定青钱柳药材；（2）采用薄层色谱法鉴别青钱柳药材活性成分金丝桃苷和异槲皮苷，进行青钱柳的确认判断方法；（3）采用先碳化热解，再用ICP‑MS验证青钱柳的鉴定结果。本发明能够实现高效、准确地鉴别青钱柳药材，弥补了青钱柳药材显微鉴别的空白，结合薄层色谱法再鉴定，创新的采用先碳化热解，再用ICP‑MS验证的方法对青钱柳的鉴定结果验证，对提高和加强青钱柳药材的质量控制、保证产品质量具有重大意义；同时对临床用药的有效性与安全性具有重要指导意义。

技术领域

本发明涉及药材鉴别技术领域，具体是一种青钱柳药材的谱鉴别方法。

背景技术

青钱柳（Cyclocaryapaliurus（Batal.）Iljin.）是双子叶植物纲（Dicotyledoneae）胡桃科（Juglandaceae）青钱柳属植物，是我国独有的单种属植物，是国家重点保护的濒危植物之一，属于三类保护植物。现代研究试验表明，青钱柳具有调节血脂、降血糖、增强免疫力等功效。据《中国中药资源纪要》记载，其树皮树叶具有清热解毒、祛痈止痛之功效，其根、茎、枝均可入药。

随着各相关学科领域的深入研究，近年来不断地有青钱柳新的分布的报道，化学成分不断被分离、鉴定，而有关免疫、降血压、血糖和抑制血清胆固醇升高等多方面的药理、药效学研究充分证实了青钱柳的药效。由于青钱柳的特殊生长环境、特殊的地理环境和重要的经济价值，使得人们的研究兴趣倍加强烈。

目前市场流通与销售的青钱柳药材，虽然可以用检验仪器的手段，证明青钱柳的若干标记物的存在，如槲皮素和山柰素的含量，但以上标记物较容易买到，而且不贵，理论上可以用来作为添加剂，所以理化检验既不能检出杂质，也不能辨别赝品。由于青钱柳价格高昂，为了保护消费者的利益，本领域需要建立准确鉴定青钱柳药材的方法。

发明内容

本发明的目的在于针对目前青钱柳药材显微鉴别的空白，提出了一套以显微鉴别结合薄层色谱鉴别的综合判别方法和指标。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种青钱柳药材的鉴别方法，包括如下步骤：

（1）将未粉碎的待检青钱柳药材1g用二甲基亚砜浸泡1~3小时，再取出用FAA标准液固定，-5~0℃冷冻干燥以后，分别制成表面涂片和横切面涂片以后，依次置于电子显微镜下观测；

如表面涂片能清晰观察到：上表皮不见气孔，下表皮见不定式气孔；上表皮细胞和下表皮细胞形状相似，均呈不规则状；同时，横切面涂片能够清晰观察到：下表皮着生有鳞片、单细胞非腺毛和腺毛；叶脉处表皮内方且具厚角组织；栅栏组织与海绵组织分化明显；叶脉中的维管束为外韧型；可初步判断为青钱柳药材；

（2）采用薄层色谱法鉴别活性成分金丝桃苷和异槲皮苷，包括如下步骤：

（a）取青钱柳待检药材1g，研细，添加80%甲醇50ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；

（b）取青钱柳对照药材1g，研细，添加80%甲醇50ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；

（c）取金丝桃苷、异槲皮苷对照品适量，分别加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；

（d）照《中国药典》2015年版四部通则0502薄层色谱法试验，分别吸取上述供试品溶液、对照药材溶液和对照品溶液各2μl，然后分别点于同一硅胶G薄层板上，加入展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，105℃加热至斑点清晰，置紫外灯365nm下检视；

如供试品色谱在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，可确认判断为青钱柳药材；