[发明专利]胶质母细胞瘤干细胞原代培养方法在审
| 申请号： | 201910216211.1 | 申请日： | 2019-03-21 |
| 公开（公告）号： | CN109943531A | 公开（公告）日： | 2019-06-28 |
| 发明（设计）人： | 董军;施佳;王海洋;代兴亮 | 申请（专利权）人： | 苏州大学附属第二医院 |
| 主分类号： | C12N5/095 | 分类号： | C12N5/095 |
| 代理公司： | 常州市权航专利代理有限公司 32280 | 代理人： | 黄晶晶 |
| 地址： | 215000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种胶质母细胞瘤干细胞的原代培养方法，所述方法包括以下步骤：GSCs原代培养、GSCs传代培养、GSCs冻存。本方法利用GSCs悬浮、成球性生长的特点，通过显微镜下挑选单个细胞克隆化培养。所获得的细胞表达不同干细胞标记物；加血清诱导分化后细胞呈贴壁生长，分化成不同类型细胞，分别表达神经胶质细胞标记物GFAP、神经元标记物βIII‑Tubulin、少突胶质细胞标记物MBP。证实此法可获得不同特征的GSCs，为体外基础实验提供工具细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 原代培养 胶质母细胞瘤 标记物 干细胞 干细胞标记物 少突胶质细胞 神经胶质细胞 分化 克隆化培养 神经元标记 细胞 传代培养 单个细胞 工具细胞 基础实验 贴壁生长 细胞表达 血清诱导 成球性 冻存 体外 显微镜 悬浮 生长 | ||
【主权项】：
1.一种胶质母细胞瘤干细胞的原代培养方法，其特征在于，所述方法至少包括以下步骤：（1）GSCs原代培养：a)提供胶质母细胞瘤组织单细胞悬液；b)接种，去除贴壁细胞；c)在显微镜下收集细胞悬浮球，消化，制成单细胞悬液；d)取单个细胞接种，培养；e)取悬浮生长的细胞球，接种，培养至细胞直径150~250微米。
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