[发明专利]一种基于YESS分析原核生物中蛋白相互作用的方法有效
申请号: | 201910142433.3 | 申请日: | 2019-02-26 |
公开(公告)号: | CN109872774B | 公开(公告)日: | 2021-04-02 |
发明(设计)人: | 杨世辉;杨青;唐莹;易犁 | 申请(专利权)人: | 湖北大学 |
主分类号: | G16B20/00 | 分类号: | G16B20/00;G16B25/00;C12N15/66;C12N15/70;C12N15/81 |
代理公司: | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人: | 杨采良 |
地址: | 430062 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明属于基因工程技术领域,公开了一种基于酵母内质网滞留信号筛选系统‑‑Yeast Endoplasmic reticulum Sequestration System(YESS)分析原核生物中蛋白相互作用的方法,基于pESD‑PPI质粒构建带有gfp和mCherry荧光基因的能进行Golden gate组装的表达质粒pESD‑PPI‑GFP‑mCherry;从UniProt数据库上运动发酵单胞菌中已有的数据中选择5对相互作用的蛋白对和未被报道有相互作用的蛋白对分别作为研究运动发酵单胞菌中蛋白相互作用的正对照和负对照;并对分析结果进行量化。本发明提供的用于原核生物蛋白相互作用的方法,可以达到对运动发酵单胞菌中蛋白相互作用进行高通量、定量研究。本方法具有简单、易于操作、高效、灵敏等诸多优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 yess 分析 生物 蛋白 相互作用 方法 | ||
【主权项】:
1.一种基于YESS分析原核生物中蛋白相互作用的方法,其特征在于,所述基于YESS分析原核生物中蛋白相互作用的方法包括:基于pESD‑PPI质粒构建带有gfp和mCherry荧光基因的能进行Golden gat e组装表达质粒pESD‑PPI‑GFP‑mCherry;从数据库UniProt上分别选择5对运动发酵单胞菌中相互作用的蛋白对和未被报道有相互作用的蛋白对分别作为分析运动发酵单胞菌中蛋白相互作用的正对照和负对照;对分析结果进行量化,量化的公式:单荧光比例/(单荧光比例+双荧光比例)*100%。
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