[发明专利]一种皮下填充透明质酸凝胶的制备方法

摘要

本发明涉及一种皮下填充物的制备方法，特别是一种皮下填充透明质酸凝胶的制备方法，属于生物材料制备技术领域。本发明的制备方法中采用高分子链上引入醛基、酰肼基的方法，实现细针注射和快速原位成型的效果，避免了因预成型水凝胶粘度大不易细针注射导致的爆针问题以及小分子交联剂残留引起的生物安全性问题。而且，本发明的制备方法中采用冻干后马来酰基修饰醛基透明质酸钠的工艺，实现马来酰基在透明质酸分子链上的高取代度接枝，使得透明质酸在后续原位成型的过程中，能在紫外光照射下进一步发生聚合，大大提高凝胶对于注射部位组织的粘接强度，完全克服凝胶填充物在受到外力挤压下游走移位的问题。

主权项

1.一种皮下填充透明质酸凝胶的制备方法，其特征在于，所述制备方法按以下步骤进行：a.醛基透明质酸钠的制备将透明质酸钠置于去离子水中，透明质酸钠与去离子水质量体积比为1g：20～100mL，室温下搅拌10小时，形成透明质酸钠水溶液，在透明质酸钠水溶液中加入高碘酸钠，透明质酸钠分子链上羟基与高碘酸钠的摩尔比为1：0.05～10，室温下搅拌均匀，在25～60℃条件下反应，反应时间为1～24小时，将反应结束后的透明质酸钠、高碘酸钠的混合溶液进行透析，透析时间为2天，形成醛基透明质酸钠溶液，将醛基透明质酸钠溶液在温度为‑50℃、压强为1～20Pa条件下，冷冻干燥48小时，得到醛基摩尔取代度为0.1～0.9的醛基透明质酸钠；b.马来酰化醛基透明质酸钠的制备将由步骤a得到的醛基透明质酸钠和马来酸酐置于非质子溶剂中，醛基透明质酸钠与非质子溶剂质量体积比为1g：5～100mL，醛基透明质酸钠N‑乙酰‑D‑氨基葡糖单元上羟基与马来酸酐的摩尔比为1：1～10，室温下搅拌均匀，在25～80℃条件下反应，反应时间为12～48小时，在反应结束后的醛基透明质酸钠、马来酸酐、非质子溶剂的混合溶液中加入1mol/L的碱溶液，调整混合溶液的pH值至7‑8，将调整pH值后的混合溶液进行透析，透析时间为2天，形成马来酰化醛基透明质酸钠溶液，将马来酰化透明质酸钠溶液在温度为‑50℃、压强为1～20Pa条件下，冷冻干燥24～72小时，得到马来酰基摩尔取代度为1.0～2.0的马来酰化醛基透明质酸钠；c.酰肼基透明质酸钠的制备将透明质酸钠置于去离子水中，透明质酸钠与去离子水质量体积比为1g：20～100mL，室温下搅拌10小时，形成透明质酸钠水溶液，在透明质酸钠水溶液中依次加入己二酰肼、活化剂、活化辅助剂，透明质酸钠分子链上羧基与己二酰肼的摩尔比为1：1～40，透明质酸钠分子链上羧基与活化剂的摩尔比为1:1～10，活化剂和活化辅助剂的摩尔比为1:0.1～10，室温下搅拌均匀，在透明质酸、己二酰肼、活化剂、活化辅助剂的混合溶液中加入0.1mol/L的盐酸，将混合溶液的pH调至3.0～6.5，调整pH后的混合溶液在5～40℃条件下反应，反应时间为1～24小时，将反应结束后的混合溶液进行透析，透析时间为2天，形成酰肼基透明质酸钠溶液，将酰肼基透明质酸钠溶液在温度为‑50℃、压强为1～20Pa条件下，冷冻干燥48小时，得到酰肼基摩尔取代度为0.1～0.8的酰肼基透明质酸钠；d.皮下填充透明质酸凝胶的制备将由步骤b得到的马来酰化醛基透明质酸钠与紫外光引发剂、磷酸盐缓冲溶液按照质量百分比分别为：马来酰化醛基透明质酸钠                2～20％光引发剂                              0.05～0.1％磷酸盐缓冲溶液                        79.9～97.95％的比例，室温下混合均匀，得到透明质酸凝胶A组分；将由步骤c得到的酰肼基透明质酸钠与紫外光引发剂、磷酸盐缓冲溶液按照质量百分比分别为：酰肼基透明质酸钠                     2～20％光引发剂                             0.05～0.1％磷酸盐缓冲溶液                       79.9～97.95％的比例，室温下混合均匀，得到透明质酸凝胶B组分；将透明质酸凝胶A组分、透明质酸凝胶B组分按照体积比1:1混合，得到皮下填充透明质酸凝胶。