[发明专利]一种补料分批发酵枯草芽孢杆菌制备褐藻胶裂解酶的方法在审
| 申请号： | 201910088991.6 | 申请日： | 2019-01-30 |
| 公开（公告）号： | CN110257360A | 公开（公告）日： | 2019-09-20 |
| 发明（设计）人： | 胡永红;王煜洲;杨文革;周俊;曹洋;马小平 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12N1/20;C12R1/125 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 徐冬涛;袁正英 |
| 地址： | 210009 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种补料分批发酵枯草芽孢杆菌制备褐藻胶裂解酶的方法，该包括：活化菌种，补料分批发酵培养，菌体破碎，提取粗酶液。本方法工艺简单，生产周期短，操作简便，与传统生产途径相比，上述芽孢杆菌所产的褐藻胶降解酶酶活力高，发酵效率高。 | ||
| 搜索关键词： | 补料分批发酵 褐藻胶裂解酶 枯草芽孢杆菌 制备 生产周期 褐藻胶降解 传统生产 发酵效率 活化菌种 菌体破碎 芽孢杆菌 粗酶液 酶酶 | ||
【主权项】：
1.一种补料分批发酵枯草芽孢杆菌制备褐藻胶裂解酶的方法，其具体步骤如下：(1)将枯草芽孢杆菌NJWGYHYH20130799接入液体培养基中活化，将活化好的菌种涂布于固体培养基中，长出菌落后挑选单菌落接入液体培养基中培养，得到种子液；(2)补料分批发酵：将种子液接入发酵罐的发酵培养基中发酵培养，发酵进行6～12h时补料添加海藻酸钠，使浓度在10～16h内保持在20～40g/L；发酵进行3～5h时，每隔10～20min补料添加葡萄糖，使其浓度保持在2～4g/L；发酵进行到第10～12h时，改成每隔30min～40min添加葡萄糖，使其浓度控制在0.5～2g/L，发酵进行22～32h时停止补料添加；控制温度、通气量、转速和pH值，发酵培养36～48h得发酵液；(3)将上述发酵液在3～5℃下、经离心去除上清液后收集菌体，将收集的菌体进行破碎处理；随后将破碎液在3～5℃下离心去除细胞碎片沉淀，收集上清液得到粗酶液。
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