[发明专利]一种催化性能提高的角蛋白酶突变体及应用在审
| 申请号： | 201910068548.2 | 申请日： | 2019-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN109593746A | 公开（公告）日： | 2019-04-09 |
| 发明（设计）人： | 史劲松;龚劲松;苏畅;许正宏;李恒;孙雨欣 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/52 | 分类号： | C12N9/52;C12N15/55;C12N15/75;C12N15/70;C12N1/21 |
| 代理公司： | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人： | 杨慧林 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种催化性能提高的角蛋白酶突变体及应用，属于基因工程技术领域。本发明提供了一株基于前导肽工程和多位点饱和突变构建的重组角蛋白酶及前导肽工程改造的方法。重组菌株M7表现出高角蛋白酶催化潜力，酶活从179U/mL显著改善至1114U/mL，最适反应温度为40℃，最适反应pH为10.0，在40℃水浴90min后仍保留超过80％的酶活，热稳定性较好，适合于工业化大规模生产。并且利用前导肽工程改造蛋白酶的方法可以成为修饰具有自剪切特性的工业酶的通用途径。 | ||
| 搜索关键词： | 角蛋白酶 前导肽 蛋白酶 催化性能 工程改造 突变体 酶活 基因工程技术 催化潜力 剪切特性 热稳定性 通用途径 重组菌株 反应pH 工业酶 多位 高角 构建 水浴 修饰 突变 应用 饱和 保留 表现 | ||
【主权项】：
1.一种角蛋白酶突变体，其特征在于，以氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的角蛋白酶为亲本，将亲本角蛋白酶前导肽切割位点P1的酪氨酸、前导肽区域第42位点的丝氨酸、54位点的天冬酰胺、62位点的异亮氨酸、91位点的谷氨酸、95位点的丝氨酸中至少一处突变为其他的氨基酸。
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