[发明专利]一种基于磁珠法的无醇病毒核酸提取试剂盒

摘要

本发明提供了一种基于磁珠法的无醇病毒核酸提取试剂盒，含有裂解液；磁珠溶液；蛋白酶K；polyA溶液；去蛋白液；洗涤液；缓冲液。本发明还提供了采用上述的试剂盒提取核酸的方法，先加入样本、裂解液和磁珠进行混匀，然后边裂解边捕获核酸分子，最后分别采用特有的无醇去蛋白液和洗涤液洗涤去除磁珠表面的蛋白质和盐离子等杂质。与常规的病毒核酸提取方法相比较，操作步骤简单，不需要单独加入结合液，实现了裂解和结合同时进行，DNA和RNA共提；整个操作过程中不加入乙醇或异丙醇，抑制物质残留少，实验步骤简便，整个流程下来仅需要40min左右；安全无污染，无氯仿苯酚等有毒试剂，既可以手工操作也可以用于自动化平台。

主权项

1.一种基于磁珠法无醇病毒核酸提取试剂盒，其特征在于包括如下试剂：裂解液，所述的裂解液中含有浓度为25‑75 mM的Tris‑HCL，所述的Tris‑HCL的pH为8.0，浓度3‑5 M的异硫氰酸胍，质量百分比浓度为5‑15%的聚多卡醇，质量百分比浓度为5‑15% 的PEG6000；磁珠溶液，所述的磁珠溶液的浓度为50‑100mg/mL，所述的磁珠为硅羟基或羧基修饰的磁珠；蛋白酶K，所述的蛋白酶K的浓度为50‑100 mg/mL；polyA溶液，所述的polyA的浓度为10‑50 mM；去蛋白液，所述的去蛋白液中含有浓度为1‑3M 的异硫氰酸胍，浓度为的10‑20 mM Tris‑HCL，所述的Tris‑HCL的pH为8.0‑ 9.0，质量百分比浓度为5‑10%的PEG6000；洗涤液，所述的洗涤液中含有浓度为10‑50mM的 Tris‑HCL，所述的Tris‑HCL的pH为8.0‑ 9.0，质量百分比浓度为5‑10%的PEG6000，浓度为200‑300mM的Nacl；缓冲液，所述的缓冲液为浓度为10‑20 mM的Tris‑HCL，所述的Tris‑HCL的pH为pH8.0‑9.0。