[发明专利]基于无机多磷酸盐的能量再生的无细胞表达系统有效
| 申请号： | 201880014094.4 | 申请日： | 2018-01-02 |
| 公开（公告）号： | CN110325641B | 公开（公告）日： | 2020-10-27 |
| 发明（设计）人： | 亚历山大·科格林;迈克尔·亨伯特 | 申请（专利权）人： | 耐特希生物有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N1/21;C12N9/12;C12N15/113 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝传鑫;熊永强 |
| 地址： | 美国新墨西哥州87*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种体外无细胞表达系统，该系统包含一种新型无机多磷酸盐基能量再生系统。在某些实施方案中，本发明包括无细胞表达系统，该系统使用双酶系统从无机多磷酸盐中再生细胞能量源ATP。在该实施方案中，该双酶系统可包括热稳定的腺苷激酶和/或多磷酸激酶。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 无机 磷酸盐 能量 再生 细胞 表达 系统 | ||
【主权项】：
1.一种热稳定的无细胞蛋白质表达系统，包括：‑含有衍生自嗜热微生物培养物的细胞提取物的反应混合物，所述嗜热微生物培养物具有体外大分子合成所需的所有无细胞反应组分，其中所述嗜热微生物经遗传修饰用于：‑敲除OmpT同源物的表达；‑敲除RNasel的表达；‑敲除DNA甲基化依赖性DNA酶的表达；‑减少培养密度依赖的孢子形成操纵子的表达；‑过表达西格玛因子RpoD；和‑过表达RNA聚合酶(RNAP)或其任何组合；‑至少一种核酸合成模板；‑一定量的纯化热稳定RNAP；‑一种细胞三磷酸腺苷(ATP)能量再生系统，包括：‑一定量的纯化腺苷激酶(AdK)酶；和‑一定量的纯化多磷酸激酶(PPK)酶；‑一定量的无机多磷酸盐(PPi)；和‑一定量的腺苷一磷酸(AMP)；‑其中所述AdK和PPK酶协同作用以从PPi和AMP再生细胞ATP能量。
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