[发明专利]基于无机多磷酸盐的能量再生的无细胞表达系统有效
申请号: | 201880014094.4 | 申请日: | 2018-01-02 |
公开(公告)号: | CN110325641B | 公开(公告)日: | 2020-10-27 |
发明(设计)人: | 亚历山大·科格林;迈克尔·亨伯特 | 申请(专利权)人: | 耐特希生物有限公司 |
主分类号: | C12N15/74 | 分类号: | C12N15/74;C12N1/21;C12N9/12;C12N15/113 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 郝传鑫;熊永强 |
地址: | 美国新墨西哥州87*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 无机 磷酸盐 能量 再生 细胞 表达 系统 | ||
1.一种适用于蛋白质表达的无细胞系统,包括:
-无细胞表达生物反应器,具有:
-含有耐热细菌的细胞提取物的反应混合物,所述耐热细菌的细胞提取物具有体外大分子合成所需的所有无细胞反应组分;
-至少一种核酸合成模板;
-一种细胞三磷酸腺苷能量再生系统,包括:
-一定量的热稳定的腺苷激酶;和
-一定量的热稳定的多磷酸激酶;
-一定量的无机多磷酸盐;和
-一定量的腺苷一磷酸;
-其中,所述腺苷激酶的量高于所述多磷酸激酶的量,所述腺苷激酶和所述多磷酸激酶协同作用以从所述无机多磷酸盐和所述腺苷一磷酸再生细胞三磷酸腺苷能量;
其中,所述腺苷激酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示,所述多磷酸激酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示。
2.如权利要求1所述的无细胞系统,还包含一定量的山梨糖醇-脱氢酶。
3.如权利要求1所述的无细胞系统,还包含从用于产生所述细胞提取物的相同类型的微生物中分离的一定量的tRNA。
4.如权利要求1所述的无细胞系统,其中所述至少一种核酸合成模板包含线性DNA模板。
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