[发明专利]一种犬干扰素的制备方法有效
| 申请号： | 201811563406.5 | 申请日： | 2018-12-20 |
| 公开（公告）号： | CN109371050B | 公开（公告）日： | 2022-02-11 |
| 发明（设计）人： | 李守军;王甜;孙晨;付旭彬;王艳晓 | 申请（专利权）人： | 天津瑞普生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C07K14/555 |
| 代理公司： | 天津合正知识产权代理有限公司 12229 | 代理人： | 陈松 |
| 地址： | 300308 天津市滨海*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种犬干扰素的制备方法，该方法通过培养携带犬干扰素基因的重组质粒的大肠杆菌获得种子液，并以一定浓度接种菌液，然后经低温诱导获得发酵菌液，发酵菌液经离心收菌体，菌体经破碎离心收获包涵体，包涵体经洗涤、重悬、低温静水压复性和层析纯化后获得犬干扰素，该方法的优势在于采用低温诱导结合低温静水压复性提高包涵体复性率和蛋白活性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 干扰素 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种犬干扰素的制备方法，其特征在于，包括：1)构建含有犬干扰素基因的重组质粒的大肠杆菌表达体系，并培养以获取种子液；2)种子液经扩大培养后在38℃‑40℃诱导表达，得到发酵菌液；3)发酵菌液经破碎、离心后得到包涵体；4)包涵体经洗涤后，用含β‑巯基乙醇或二硫苏糖醇的尿素浓度为2‑4mol/L重悬液重悬；5)将重悬后的包涵体在2‑8℃、静水压100‑300bp的条件下复性，复性产物经层析纯化后得到犬干扰素。
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