[发明专利]循环肿瘤细胞表面标志分子HER2的检测方法在审
申请号: | 201811523965.3 | 申请日: | 2018-12-13 |
公开(公告)号: | CN109541214A | 公开(公告)日: | 2019-03-29 |
发明(设计)人: | 钱军;周丽 | 申请(专利权)人: | 钱军 |
主分类号: | G01N33/574 | 分类号: | G01N33/574;G01N33/532 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人: | 杨军 |
地址: | 201203 上海市浦东新区自*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种循环肿瘤细胞表面标志分子HER2的检测方法,包括以下步骤:将全血用红细胞裂解液处理,分离出有核细胞,并用甲醛进行固定;先通过肿瘤免疫荧光标志物细胞角蛋白抗体anti‑CK进行阳性筛选,用Her2一抗孵育所有细胞,然后用标记有FITC荧光基团的Her2二抗孵育,再用细胞核荧光染料DAPI标记出所有细胞;采用高通量多色成像分析,选择CY5、FITC和DAPI的滤光片,观察通道表面荧光颜色,即实现对循环肿瘤细胞表面标志分子Her2的检测;本发明同现有技术相比,该检测方法简便、快速、经济,无创,灵敏度高,特异性好,能够解决现有技术检测HER2的不足,值得推广应用。 | ||
搜索关键词: | 表面标志分子 循环肿瘤细胞 检测 孵育 细胞角蛋白抗体 红细胞裂解液 细胞核 荧光标志物 细胞 表面荧光 多色成像 观察通道 技术检测 阳性筛选 荧光基团 荧光染料 肿瘤免疫 灵敏度 高通量 核细胞 滤光片 二抗 全血 无创 一抗 甲醛 并用 分析 | ||
【主权项】:
1.一种循环肿瘤细胞表面标志分子HER2的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将全血用红细胞裂解液处理,分离出有核细胞,并用甲醛进行固定;2)先通过肿瘤免疫荧光标志物细胞角蛋白抗体anti‑CK进行阳性筛选,用Her2一抗孵育所有细胞,然后用标记有FITC荧光基团的Her2二抗孵育,再用细胞核荧光染料DAPI标记出所有细胞;3)采用高通量多色成像分析,选择CY5、FITC和DAPI的滤光片,观察通道表面荧光颜色,即实现对循环肿瘤细胞表面标志分子Her2的检测。
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