[发明专利]从甜茶中提取甜茶素和熊果酸的方法

摘要

本发明提供一种从甜茶中提取甜茶素和熊果酸的方法，包括粉碎、醇取、过滤、浓缩、水溶、碱溶、过滤，滤渣经黑曲霉发酵、再次醇取、过滤、浓缩、水溶、碱溶，分别上柱层析，洗脱、减压浓缩，结晶重结晶一次得甜茶素纯品和熊果酸纯品。本发明通过微生物转化，提高其功能成分的溶出和转化效率，同时利用黑曲霉产酸中和碱处理物，也有利于黑曲霉快速生长；另外采用醇提、再用水溶和碱溶方式将甜茶素和熊果酸分开，经柱层析和结晶获得高纯度产品，有效防止甜茶素在碱试剂下破坏，提高了其产率。

主权项

1.一种从甜茶中提取甜茶素和熊果酸的方法，其步骤包括如下：(1)粉碎干燥甜茶，加入70～85％乙醇水溶液，在70～80℃进行回流提取1～3h，过滤，得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ，其中乙醇水溶液体积L与甜茶重量kg为2～4:1；(2)滤液Ⅰ减压浓缩至浸膏，加入水溶解，过滤，得滤液Ⅱ和滤渣Ⅱ，其中加入水体积L与滤液Ⅰ体积L比为1～2:10；(3)滤渣Ⅱ加入0.2～0.8mol/L氢氧化钠溶液至7.2～7.8，进行搅拌溶解，过滤，得滤液Ⅲ和滤渣Ⅲ；(4)滤渣Ⅲ与滤渣Ⅰ进行混合，加入4～10％黑曲霉发酵液，常温发酵4～6天，再加入70～85％乙醇水溶液，在70～80℃进行回流提取1～3h，过滤，得滤液Ⅳ和滤渣Ⅳ，其中乙醇水溶液体积L与甜茶重量kg为2～4:1；(5)滤液Ⅳ减压浓缩至浸膏，加入水溶解，过滤，得滤液Ⅴ和滤渣Ⅴ，其中加入水体积L与滤液Ⅳ体积L比为1～2:10；(6)滤渣Ⅴ加入0.2～0.8mol/L氢氧化钠溶液至7.2～7.8，进行搅拌溶解，过滤，得滤液Ⅵ；(7)将滤液Ⅱ与滤液Ⅴ合并，上XD‑5树脂，用三至五倍柱体积的40％～60％乙醇进行洗脱，收集洗脱液Ⅰ，直接加入95％乙醇至终浓度为75％～85％，冰箱放置过夜，结晶重结晶一次得甜茶素纯品；(8)将滤液Ⅲ与滤液Ⅵ合并，调节至5.5～6.5，再加入两至四倍体积丁醇进行萃取，得丁醇萃取液，减压浓缩至原有体积的1/5～1/15，直接上D4006大孔树脂柱，用四至六倍柱体积的80％～85％乙醇进行洗脱，减压浓缩至原有体积的1/5～1/10，静置15～30min，趁热过滤1次，所得滤液冰箱放置过夜，结晶与重结晶一次得熊果酸纯品。