[发明专利]一种气单胞菌多价DNA疫苗的制备方法及其应用在审
| 申请号： | 201811461669.5 | 申请日： | 2018-12-02 |
| 公开（公告）号： | CN109568572A | 公开（公告）日： | 2019-04-05 |
| 发明（设计）人： | 赵贤亮;孔祥会;裴超;李莉;靳朝晖 | 申请（专利权）人： | 河南师范大学 |
| 主分类号： | A61K39/116 | 分类号： | A61K39/116;A61K39/02;A61P31/04;C12N15/85;C12N15/31 |
| 代理公司： | 新乡市平原智汇知识产权代理事务所(普通合伙) 41139 | 代理人： | 路宽 |
| 地址： | 453007 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种气单胞菌多价DNA疫苗的制备方法及其应用，属于水产动物病害防治技术领域。本发明的技术方案要点为：设计用于扩增嗜水气单胞菌主要粘附素基因的特异性引物，引物序列为mah‑F：5’CGCGGATCCATGAAAAAGACAATTCTGGC 3’；mah‑R：5’CCCAAGCTTTTAGAAGTTGTATTGCAGGG 3’，下划线为酶切位点；细菌培养并提取嗜水气单胞菌DNA；扩增嗜水气单胞菌主要粘附素基因片段，以pcDNA3.1质粒为载体，构建重组质粒并测序验证，命名为mah‑pcDNA3.1重组质粒即气单胞菌多价DNA疫苗。本发明的DNA疫苗通过养殖鱼类免疫接种含mah基因的重组疫苗，在鱼体内产生主要粘附素蛋白并调控抗感染免疫相关基因的表达，从而有效防治多种气单胞菌的感染。 | ||
| 搜索关键词： | 嗜水气单胞菌 多价DNA疫苗 粘附素基因 气单胞菌 单胞菌 扩增 制备 构建重组质粒 技术方案要点 水产动物病害 抗感染免疫 特异性引物 酶切位点 免疫接种 细菌培养 相关基因 养殖鱼类 有效防治 重组疫苗 重组质粒 下划线 粘附素 测序 引物 质粒 应用 蛋白 体内 验证 感染 基因 调控 防治 | ||
【主权项】：
1.一种气单胞菌多价DNA疫苗的制备方法，其特征在于具体过程为：步骤S1：设计用于扩增嗜水气单胞菌主要粘附素基因的特异性引物，引物序列为mah‑F：5’ CGCGGATCCATGAAAAAGACAATTCTGGC 3’；mah‑R：5’ CCCAAGCTTTTAGAAGTTGTATTGCAGGG 3’，下划线为酶切位点；步骤S2：细菌培养并提取嗜水气单胞菌DNA；步骤S3：扩增嗜水气单胞菌主要粘附素基因片段，以pcDNA3.1质粒为载体，构建重组质粒并测序验证，命名为mah‑pcDNA3.1重组质粒即气单胞菌多价DNA疫苗。
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