[发明专利]一种快速建立CRISPR基因编辑肝癌细胞株的方法及细胞株在审
| 申请号： | 201811448444.6 | 申请日： | 2018-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN111254164A | 公开（公告）日： | 2020-06-09 |
| 发明（设计）人： | 朴海龙;李同明 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N15/867;C12N5/10 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 马驰 |
| 地址： | 116023 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种快速建立基因编辑肝癌细胞株的方法。本发明将CRISPR/Cas 9技术进行改良，通过构建表达效率更佳的重组质粒，结合快速单克隆培养，构建稳定敲除基因的肝癌细胞株。所需sgRNA通过引物合成精准获得，通过两步PCR合成插入片段装入载体，构建成用于敲除的重组质粒；经包装慢病毒后与肝癌细胞共孵育，通过慢病毒介导将sgRNA与Cas9蛋白同时等量导入肝癌细胞；对基因编辑后的肝癌细胞进行嘌呤霉素(Puromycin)抗性筛选同时进行单克隆化培养，最终快速获得基因敲除阳性的稳定肝癌细胞株。本方法为研究基因在肿瘤发生发展中的分子机理提供了重要的实验材料，对肝癌疾病的体外细胞建模提供参考。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 建立 crispr 基因 编辑 肝癌 细胞株 方法 | ||
【主权项】：
暂无信息
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院大连化学物理研究所，未经中国科学院大连化学物理研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201811448444.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种水产养殖用水净化系统
- 下一篇：一种单轨吊的同步定位方法
