[发明专利]一种诱导副溶血性弧菌产生左氧氟沙星耐药性的方法有效
| 申请号： | 201811407217.9 | 申请日： | 2018-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN109486739B | 公开（公告）日： | 2022-02-01 |
| 发明（设计）人： | 赵勇;李欢;王思琦;张昭寰;刘海泉;潘迎捷 | 申请（专利权）人： | 上海海洋大学 |
| 主分类号： | C12N1/36 | 分类号： | C12N1/36;C12N1/20;C12N1/04;C12Q1/18;C12R1/63 |
| 代理公司： | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227 | 代理人： | 胡永宏 |
| 地址： | 201306 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种诱导副溶血性弧菌产生左氧氟沙星耐药性的方法，包括：敏感菌株筛选、亚致死抗生素浓度初步诱导和连续诱导、耐药性菌株保藏步骤，本发明诱导后的副溶血性弧菌经验证获得了左氧氟沙星耐药性，其MIC值均达到了CLSI的耐药标准，即副溶血性弧菌的MIC值≥8mg/L，且这种耐药性能够稳定地遗传；本发明的诱导方法可快速获得具有稳定遗传特性的耐药性菌株，为副溶血性弧菌对左氧氟沙星耐药机制的研究提供了可靠工具，具有良好的参考价值和实际意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 诱导 溶血 弧菌 产生 氧氟沙星 耐药性 方法 | ||
【主权项】：
1.一种诱导副溶血性弧菌产生左氧氟沙星耐药性的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、制备种子液：将副溶血性弧菌菌株从保存于‑80℃的甘油管中取出，划线接种于TCBS平板上，恒温培养活化；S2、敏感菌株筛选；S3、亚致死抗生素浓度下初步诱导；S4、亚致死抗生素浓度下连续诱导；S5、保藏耐药性副溶血性弧菌菌株；其中，步骤S1中，所述种子液的浓度为1×108～9×109CFU/mL；步骤S2中，所述筛选的敏感菌株为在1/2的MIC值中可以生长的左氧氟沙星敏感型副溶血性弧菌菌株，其中，所述MIC值为最低抑菌浓度；步骤S4中，所述亚致死抗生素浓度下连续诱导后的副溶血性弧菌MIC值≥8mg/L；步骤S5中，所述保藏的耐药性副溶血性弧菌菌株为经步骤S4中亚致死抗生素浓度下连续诱导后培养至9LogCFU/mL的突变菌株。
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