[发明专利]一种荧光检测脂肪酶活性的方法在审
申请号: | 201811398159.8 | 申请日: | 2018-11-22 |
公开(公告)号: | CN109724953A | 公开(公告)日: | 2019-05-07 |
发明(设计)人: | 马艳玲;陈甜妹;曾荣 | 申请(专利权)人: | 佛山科学技术学院 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N33/573 |
代理公司: | 广东广信君达律师事务所 44329 | 代理人: | 杨晓松 |
地址: | 528000 广东省佛山市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明属于生物质化学和可再生资源利用领域,具体涉及一种荧光检测脂肪酶活性的方法。本发明将非离子型表面活性剂溶液和姜黄素溶液混合,然后加入可溶性铜盐溶液,得到混合溶液1;将巯基乙酸甲酯溶液和磷酸盐缓冲溶液混合,得到混合溶液2;将混合溶液2和待测脂肪酶样品混合,30~40℃水浴反应10~30min,去除脂肪酶,得到混合溶液3;将混合溶液1和混合溶液3混合,20~40℃反应3~10min;进行荧光检测,然后采用外标法以荧光强度定量待测脂肪酶溶液脂肪酶活性。本发明与现有技术相比,更加灵敏、检测下限更加低,可实现微量级的检测,应用更加广泛。 | ||
搜索关键词: | 混合溶液 脂肪酶活性 荧光检测 脂肪酶 非离子型表面活性剂溶液 磷酸盐缓冲溶液 巯基乙酸甲酯 姜黄素溶液 可溶性铜盐 可再生资源 脂肪酶溶液 水浴反应 样品混合 生物质 外标法 检测 荧光 去除 灵敏 应用 | ||
【主权项】:
1.一种荧光检测脂肪酶活性的方法,其特征在于包含如下步骤:(1)将非离子型表面活性剂溶液和姜黄素溶液混合,然后加入可溶性铜盐溶液,得到混合溶液1,其中,姜黄素和可溶性铜盐的摩尔比为1:2;(2)将巯基乙酸甲酯溶液和磷酸盐缓冲溶液混合,得到混合溶液2;(3)将混合溶液2和待测脂肪酶样品混合;30~40℃水浴反应10~30min,过滤去除脂肪酶,得到混合溶液3;(4)将混合溶液1和混合溶液3混合,20~40℃反应3~10min;然后进行荧光检测,然后采用外标法以荧光强度定量待测脂肪酶溶液脂肪酶活性。
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