[发明专利]一种观察微小组织内细胞立体分布及统计细胞数目的方法有效
申请号: | 201811311740.1 | 申请日: | 2018-11-06 |
公开(公告)号: | CN109406768B | 公开(公告)日: | 2023-01-24 |
发明(设计)人: | 朱家桥;刘宗平;卞建春;刘学忠;袁燕;顾建红;张江虹 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | G01N33/533 | 分类号: | G01N33/533;G01N21/64;G01N1/30 |
代理公司: | 南京苏科专利代理有限责任公司 32102 | 代理人: | 董旭东 |
地址: | 225000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及生物组织的微观观察技术领域内一种观察微小组织内细胞立体分布及统计细胞数目的方法,将获取的待观察组织材料进行表面清洗后依次进行化学固定、脱水处理、免疫荧光染色和透明化处理;再将组织材料连同透明液移至共聚焦显微镜专用培养皿,用激光共聚焦显微镜进行逐层扫描拍照,获得整体组织各层的细胞分布图像,进行细胞立体分布的观察,再通过Imaris软件处理各层细胞分布图像数据,重建细胞组织的三维模型,观察三维立体模型中被免疫荧光标记细胞的立体分布,再利用Imaris Bitplane Spot检测分析,计算出免疫荧光标记细胞的准确数目。本发明的方法保持了待观察组织的完整性,而且观察细胞分布的清晰度和准确度都高,细胞的数目统计结果更准确。 | ||
搜索关键词: | 一种 观察 微小 组织 细胞 立体 分布 统计 目的 方法 | ||
【主权项】:
1.一种观察微小组织内细胞立体分布的方法,其特征在于,包括以下步骤:获取待观察的组织材料并进行表面清洗;对所获取的组织材料进行化学固定和脱水处理;对脱水处理后的组织材料进行免疫荧光染色;对免疫荧光染色的组织材料进行透明化处理;将透明化处理的组织材料连同透明液移至共聚焦显微镜专用培养皿,用激光共聚焦显微镜进行逐层扫描拍照,获得整体组织各层的细胞分布图像,进行细胞立体分布的观察。
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