[发明专利]一种测定乙醇脱氢酶活性的方法

摘要

本发明提供一种测定乙醇脱氢酶活性的方法，通过乙醇脱氢酶催化乙醇转化为乙醛，乙醛与3‑甲基‑2‑苯并噻唑啉酮腙盐酸盐(MBTH)及FeCl3反应生成蓝色化合物，在610nm处产生吸收峰，在一定范围内，吸光度与酶活性成正比。本发明克服了一般测定中时间难以准确控制的缺点；采用酶标仪测定，实现了样品的批量测定，降低了测定的时间成本。同时，本发明不受酶液中的杂质干扰，灵敏度和准确性高，重复性好，操作简便，效率高等优点，且不依赖高档仪器设备，便于推广应用。

主权项

1.一种测定乙醇脱氢酶活性的方法，其特征在于，通过以下步骤实现：(1)试剂配制，包括提取液配制、酶反应液配制、MBTH盐酸溶液配制、FeCl3溶液配制和乙醛标曲母液配制；(2)粗酶液制备，包括研磨、离心；(3)标准曲线绘制，包括乙醛标准系列配制、吸光度测定、绘制回归方程；(4)样品测定，包括控制反应时间、测定吸光度；(5)结果计算，包括计算公式、酶活性表示单位。