[发明专利]一种发酵液中衣康酸含量的测定方法

摘要

本发明公开了一种发酵液中衣康酸含量的测定方法，该方法包括：试样中的衣康酸经甲醇‑水溶液提取或直接稀释，经强阴离子交换固相萃取柱净化，磷酸‑甲醇溶液洗脱，再利用反相色谱柱分离，液相色谱紫外检测器测定，外标法定量。本发明可排除衣康酸发酵液中可能存在的木糖、蔗糖、葡萄糖、果糖等糖和柠檬酸的干扰，该方法的回收率高，精密度好，准确可靠，能对衣康酸的含量测定起到质量控制的目的。

主权项

1.一种发酵液中衣康酸含量的测定方法，其特征在于，该测定方法具体步骤如下：S1、试样处理：提取：取适量发酵液，离心处理后，称取定量的上清液于容量瓶中，用甲醇‑水溶液溶解，并定容；净化：取定量上述定容后的溶解液至固相萃取柱中，控制流速，弃去流出液，用甲醇‑水溶液淋洗，再用磷酸‑甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，置于氮吹管中，氮吹至干后，用磷酸溶液‑甲醇溶液震荡溶解残渣，经有机微孔滤膜过滤，得到供高效液相色谱仪分析用的试样溶液；S2、标准溶液配制：准确称取衣康酸标准品，制成衣康酸标准储备液，再精密量取衣康酸标准储备液适量，配制成系列标准曲线工作溶液；S3、仪器分析：采用高效液相色谱仪，紫外检测器测定，外标法定量；S4、结果计算：将配制的标准曲线工作溶液，按浓度由低到高的顺序进行检测，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标作图，绘制标准曲线；工作曲线的线性相关系数r2≥0.999，将净化过滤后的试样溶液注入高效液相色谱仪中，得到相应的峰高或峰面积，依据标准曲线得到待测液中衣康酸的浓度。