[发明专利]一种重组腺病毒的表达载体SAd23-L在审
申请号: | 201811139300.2 | 申请日: | 2018-09-28 |
公开(公告)号: | CN109797168A | 公开(公告)日: | 2019-05-24 |
发明(设计)人: | 罗升学;刘博超;马晓瑞;张攀丽 | 申请(专利权)人: | 广州佰芮慷生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/861 | 分类号: | C12N15/861;A61K39/12;A61P31/14 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 廖苑滨;许青华 |
地址: | 510515 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种重组腺病毒表达载体,所述载体特征包括:以野生型腺病毒SAd23的基因组为基础,通过分子克隆的方法,删除E1编码区和E3编码区,在E1删除区插入I‑Ceu I和PI‑Sce I酶切位点,同时以腺病毒人血清型Ad5的E4编码区替换SAd23的E4编码区,提高了在人源肾胚细胞(HEK293)中包装重组病毒的成功率和包装出重组病毒的滴度,获得复制缺陷性的重组腺病毒表达载体。本发明的优势在于:1.通过直接分子克隆的方法,构建大片段质粒,方法简单,易操作,可以用于任何大片段载体的构建;2.通过几次克隆连接可以构建完成腺病毒表达载体,步骤简单;3.在细菌水平筛选阳性克隆更加容易、快捷,而且缩短了腺病毒载体构建时间。 | ||
搜索关键词: | 编码区 构建 重组腺病毒 表达载体 分子克隆 重组病毒 腺病毒 删除 腺病毒表达载体 复制缺陷性 腺病毒载体 大片 酶切位点 细菌水平 阳性克隆 基因组 胚细胞 人血清 野生型 滴度 人源 质粒 成功率 替换 克隆 筛选 | ||
【主权项】:
1.一种重组腺病毒表达载体,其特征在于,以野生型腺病毒SAd23的全基因组为基础,通过直接克隆方法,删除E1编码区和E3编码区,在E1删除区插入I‑Ceu I和PI‑Sce I酶切位点,同时以腺病毒人血清型5型(Ad5)的E4编码区替换SAd23的E4编码区,获得复制缺陷型的重组腺病毒表达载体。
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