[发明专利]一种用于基因编辑的配对sgRNA及其应用在审
| 申请号： | 201811088469.X | 申请日： | 2018-09-18 |
| 公开（公告）号： | CN109295060A | 公开（公告）日： | 2019-02-01 |
| 发明（设计）人： | 谢安勇;冯依力;郭涛 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/63;C12N15/90 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;李世玉 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于基因编辑的配对sgRNA及应用，根据靶标基因或靶标基因组位点的特定编辑需求设计多条sgRNA，选择两条特定间距、对应PAM特定位置组合的sgRNA作为配对sgRNA。本发明配对Cas9‑sgRNA可以提高基因编辑效率及精准度，可以用来定量分析细胞和动物体内NHEJ，包括总NHEJ效率(即总编辑效率)、精准型NHEJ和突变型NHEJ的频率及比例、突变型NHEJ接口的增删方向、长度及频率、以及突变型NHEJ接口的微同源序列的利用度等。该技术更灵活、简单、快速，可方便地移植到各种细胞和组织器官中应用，而且准确度也不受影响。 | ||
| 搜索关键词： | 配对 突变型 基因 应用 靶标基因组 定量分析 细胞 靶标基因 同源序列 需求设计 组织器官 准确度 精准度 位点 体内 移植 灵活 | ||
【主权项】：
1.一种用于基因编辑的配对sgRNA，其特征在于所述配对sgRNA按如下方法获得：根据靶标基因或靶标基因组位点设计多条sgRNA，根据基因编辑要求选择两条不同间距sgRNA作为配对sgRNA；所述基因编辑为整码删除时配对sgRNA介导的切割间距为3n碱基对，所述基因编辑为移码突变或基因敲除时配对sgRNA介导的切割间距为3n+1或3n+2碱基对，其中n为0及0以上的整数。
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