[发明专利]蜂王浆中多菌灵类成分的检测方法

摘要

本发明公开了一种蜂王浆中多菌灵类成分的检测方法，涉及蜂王浆检测技术领域，其技术方案要点是包括以下步骤：（1）标准溶液的配制；（2）蜂王浆前处理：称取2g蜂王浆，放置在离心管中，加入0.1ml吡虫啉D4内标工作液和0.1ml多菌灵D3内标工作液，旋涡混匀，再加入质量浓度为30%的乙醇涡旋使溶液充分溶解，再加入PH值为7.5‑8的甘氨酸‑盐酸缓冲液15ml，旋涡振荡1min，超声波处理15min；（3）蜂王浆后处理；（4）色谱检测；（5）质谱检测。本发明解决了不能同时检测多菌灵、甲基托布津和乙基托布津的问题，利用PH值为7.5‑8的甘氨酸‑盐酸缓冲液，能够同时检测三种物质，且方法简单、快速、灵敏。

主权项

1.一种蜂王浆中多菌灵类成分的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）标准溶液的配制：1.1标准储备液：分别称取多菌灵、甲基托布津和乙基托布津，均用乙腈作溶剂定容在100mL的容量瓶中，配制成质量溶度为100mg/L的标准储备液，然后放在4℃下避光保存；1.2标准工作液：分别量取所述多菌灵标准储备液、甲基托布津标准储备液和乙基托布津标准储备液，并将三种标准储备液混合均匀，再用乙腈进行稀释，配制成1mg/L和0.1mg/L的混合标准溶液，然后放在4℃下避光保存；1.3内标储备液：分别称取一定量的内标多菌灵D3和内标吡虫啉D4，用适量甲醇作溶剂，并定容在100mL的容量瓶中，配制成质量浓度为100mg/L的内标储备液，然后放在4℃下避光保存；1.4内标工作液：分别量取一定量的多菌灵D3内标储备液和吡虫啉D4内标储备液，用甲醇定容，将多菌灵D3内标储备液的质量浓度配制成100ng/L，制成多菌灵D3内标工作液，将吡虫啉D4内标储备液的质量浓度配制成100ng/L，制成吡虫啉D4内标工作液；（2）蜂王浆前处理：称取2g蜂王浆，放置在离心管中，加入0.1mL吡虫啉D4内标工作液和0.1mL多菌灵D3内标工作液，旋涡混匀，再加入质量浓度为30%的乙醇涡旋使溶液充分溶解，再加入PH值为7.5‑8的甘氨酸‑盐酸缓冲液15mL，旋涡振荡1min，超声波处理15min；（3）蜂王浆后处理：用活化后的HLB固相萃取柱，取上清液上样，用5mL水润洗小柱，再用5ml乙腈洗脱，洗脱液在40‑45℃下水浴下氮气吹干，用5mL体积比为1：1的乙腈和水溶液溶解并定容至1mL，过0.22um油系微孔滤膜，得滤液；（4）色谱检测：用SepaxGP‑C18色谱柱（150mm×4.6mm，5um）进行检测；（5）质谱检测：离子源：电喷雾离子源（ESI）；扫描方式：正离子扫描模式；检测模式：多反应检测模式；喷雾电压：3000V；毛细管温度：350℃；雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气；雾化气压为450kPa；辅助加热气压：350kPa；气帘气压70kPa，碰撞气压：40kPa。