[发明专利]一种测定壳寡糖含量的方法

摘要

本发明涉及一种测定壳寡糖含量的方法，属于大分子检测技术领域。本发明采用苯酚‑荧光分光光度法，利用壳寡糖与苯酚溶液混合后，壳寡糖的氨基和苯酚的羟基结合，使混合水溶液的pH值改变，苯酚发生荧光淬灭，导致荧光强度呈指数下降，使壳寡糖的浓度与荧光对数值在一定范围内呈线性关系，用于壳寡糖的含量测定。此方法费用低，灵敏度高，稳定性强，重现性好，检测浓度范围为0～2.4mg/ml，使用广泛，可用于不同剂型壳寡糖的含量测定，解决了现有技术中操作繁琐、成本高、准确性低、测定范围窄的问题。

主权项

1.一种测定壳寡糖含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)绘制壳寡糖的标准曲线：向比色管中分别加入0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0和6.0ml的浓度为4.00mg/ml的壳寡糖标准品储备液，后加入100μl苯酚水溶液，蒸馏水定容，摇匀，制备得到浓度梯度为0、0.40、0.80、1.20、1.60、2.00和2.40mg/ml的壳寡糖标准溶液，于荧光分光光度仪上测定荧光强度F值，并建立lnF与壳寡糖浓度C之间的线性关系曲线；2)样品工作液的配备：取壳寡糖待测样品，加入蒸馏水，混合均匀，配制成浓度为3～5mg/ml的壳寡糖溶液；3)样品中壳寡糖含量测定：取样品工作液2‑6ml，按步骤1)检测方法进行测定，记录荧光强度F值，计算lnF值，并带入线性回归方程中求得样品浓度，即得。