[发明专利]一种百合皂苷单体的分离纯化方法

摘要

本发明提供一种百合皂苷单体的分离纯化方法。本发明以百合干燥肉质鳞叶为原料，经特定浓度的乙醇提取，大孔吸附树脂进行粗分，然后在高效液相色谱仪监控的条件下，以Sephadex LH‑20凝胶色谱柱细分，最后经过反向硅胶色谱柱纯化，得到三个单体化合物。本发明通过最适宜的工艺及参数条件的组合，可有效除去百合中的大量杂质，一次性可获取多个的已知活性的百合皂苷，从而可为皂苷类化合物的活性研究和单一成分的新药开发提供物质基础。

主权项

1.一种百合皂苷单体的分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤一、将百合鳞叶的提取物加入填充有非极性大孔吸附树脂的层析柱中，分别用3～5个柱体积的水、体积浓度为8～12％的乙醇溶液和体积浓度为38～41％的乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，然后以3～5个柱体积的体积浓度为79～82％的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，蒸干，得干浸膏；/n步骤二、将所述干浸膏加入装有Sephadex LH-20的凝胶色谱柱中，用体积浓度为49～53％甲醇溶液或乙醇溶液洗脱，并以高效液相色谱进行检测监控，收集得到5个组分，按照收集的时间顺序记为组分1，组分2，组分3，组分4，组分5；其中，高效液相色谱的检测波长为203nm，固定相：十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱；流速：0.8～1.2ml/min；柱温：25～35℃，/n流动相：水为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱，梯度洗脱顺序为：/n0～5min，流动相A为92％，流动相B为8％；/n5～12min，流动相A为92％～80％，流动相B为8％～20％；/n12～25min，流动相A为80％～45％，流动相B为20％～55％；/n25～30min，流动相A为45％～5％，流动相B为55％～95％；/n30～35min，流动相A为5％，流动相B为95％；/n步骤三、将所述组分3、组分4和组分5分别经反向硅胶色谱柱纯化，分别得第一单体化合物、第二单体化合物和第三单体化合物，其结构式分别如式I、式Ⅱ和式Ⅲ所示：/n