[发明专利]基于纳米金信号放大的液晶免疫传感器检测HBD-2的方法在审
申请号: | 201810975899.7 | 申请日: | 2018-08-24 |
公开(公告)号: | CN109212224A | 公开(公告)日: | 2019-01-15 |
发明(设计)人: | 苏秀霞;霍文静;徐佳;张婧;张蓉;贺生卓;张海宁 | 申请(专利权)人: | 陕西科技大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N21/78;G01N21/17 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 徐文权 |
地址: | 710021 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于纳米金信号放大的液晶免疫传感器检测人HBD‑2的方法,包括以下步骤:将下玻片用戊二醛溶液进行浸泡,冲洗后得经醛基化修饰的下玻片;将AuNPs加入到HBD‑2抗体中,再进行静置、离心及分散,得AuNPs修饰的HBD‑2抗体复合物,将AuNPs的修饰HBD‑2抗体复合物滴加到经醛基化修饰的下玻片上,吹开后温育,再冲洗后吹干;将得到的HBD‑2‑BSA溶液滴加到下玻片上,吹开后温育,冲洗后吹干;6)将上玻片放置于下玻片上,其中,上玻片与下玻片之间设置有带有空腔的Mylar聚酯片,同时将液晶5CB加热使其呈各向同性的液态,然后将液晶5CB注入到所述空腔内,再冷却,得液晶池,再根据液晶池的光学图像信号检测HBD‑2,该方法能够快速、灵敏、简便的检测人类β防御素‑2。 | ||
搜索关键词: | 下玻片 冲洗 检测 抗体复合物 免疫传感器 醛基化修饰 液晶5CB 纳米金 上玻片 液晶池 吹干 滴加 温育 修饰 液晶 光学图像信号 戊二醛溶液 防御素 聚酯片 再冷却 抗体 空腔 加热 浸泡 灵敏 | ||
【主权项】:
1.一种基于纳米金信号放大的液晶免疫传感器检测HBD‑2的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将玻片切割为上玻片及下玻片,再将上玻片及下玻片放置于Piranha溶液中并于80‑100℃下进行浸泡,然后清洗后用无水乙醇进行浸泡,最后吹干;2)将上玻片浸泡于DMOAP水溶液中,冲洗后吹干,同时将下玻片浸泡于80‑100℃下APTES及DMOAP的乙醇溶液中,然后清洗及吹干;3)将下玻片用戊二醛溶液在常温下进行浸泡,冲洗后得经醛基化修饰的下玻片;将AuNPs加入到HBD‑2抗体中,再进行静置、离心及分散,得AuNPs修饰的HBD‑2抗体复合物,将AuNPs的修饰HBD‑2抗体复合物滴加到经醛基化修饰的下玻片上,吹开后放置于35‑40℃下温育2‑4h,再冲洗后吹干;4)将待检测HBD‑2溶液加入到EDC与NHS的水溶液中,活化后滴加到BSA溶液中,再震荡反应,得HBD‑2‑BSA溶液;5)将步骤4)得到的HBD‑2‑BSA溶液滴加到经步骤3)得到的下玻片上,吹开后放置于35‑40℃下温育1‑2h,冲洗后吹干;6)将经步骤2)得到的上玻片放置于经步骤5)得到的下玻片上,其中,上玻片与下玻片之间设置有Mylar聚酯片,Mylar聚酯片内设置有空腔,Mylar聚酯片的侧面设置有该空腔的开口,同时将液晶5CB加热使其呈各向同性的液态,然后将液晶5CB从该开口处注入到所述空腔内,并使得液晶5CB布满整个空腔,再冷却至室温,得液晶池,最后液晶池放置到偏光显微镜下进行检测,并根据液晶池的光学图像信号检测HBD‑2。
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