[发明专利]一种口蹄疫病毒样颗粒抗原的制备方法及其制备的口蹄疫病毒样颗粒抗原和应用有效
申请号: | 201810857814.5 | 申请日: | 2018-07-31 |
公开(公告)号: | CN110777160B | 公开(公告)日: | 2023-06-16 |
发明(设计)人: | 田克恭;张素玲;孙进忠;张许科 | 申请(专利权)人: | 普莱柯生物工程股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C07K14/09;A61K39/135;A61P31/14 |
代理公司: | 北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙) 11017 | 代理人: | 韩登营 |
地址: | 471000 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明提供了一种口蹄疫病毒样颗粒抗原的制备方法,该方法通过表达的豆蔻酰化转移酶对口蹄疫病毒衣壳前体蛋白P1进行豆蔻酰化修饰,改善了3C蛋白酶酶切后VP0,VP3和VP1衣壳蛋白组装形成所述口蹄疫病毒样颗粒的稳定性。其制备的疫苗组合物具有良好的免疫原性,较相同血清型的商业疫苗产生抗体更快、产生的抗体滴度更高,维持期也更长。 | ||
搜索关键词: | 一种 口蹄疫病毒 颗粒 抗原 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种口蹄疫病毒样颗粒抗原的制备方法,其中,所述方法包括:/n步骤(1)分别克隆、重组口蹄疫病毒衣壳前体蛋白P1全长基因和豆蔻酰化转移酶的基因到表达载体,获得口蹄疫病毒衣壳前体蛋白P1的重组表达质粒和豆蔻酰化转移酶的重组表达质粒;/n步骤(2)将所述步骤(1)获得的所述口蹄疫病毒衣壳前体蛋白P1的重组表达质粒和所述豆蔻酰化转移酶的重组表达质粒转化到大肠杆菌,获得所述大肠杆菌的重组表达菌株;/n步骤(3)将所述步骤(2)的所述大肠杆菌的重组表达菌株培养表达,诱导豆蔻酰化转移酶的表达,然后诱导可溶性P1蛋白的表达;/n步骤(4)从所述步骤(3)的表达体系中分离所述大肠杆菌的重组表达菌株,破碎菌体后分离上清液并纯化其中的P1蛋白;/n步骤(5)使用3C蛋白酶酶切豆蔻酰化修饰的口蹄疫病毒衣壳前体蛋白P1,得到VP0,VP3和VP1衣壳蛋白,其自我组装形成所述口蹄疫病毒样颗粒。/n
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