[发明专利]一种依赖T5核酸外切酶和PEG8000完成DNA组装的试剂盒及其应用

摘要

本发明公开了一种依赖T5核酸外切酶和PEG8000完成DNA组装的试剂盒，是由T5核酸外切酶和含PEG8000的缓冲体系组成；以总体系为20uL计，T5核酸外切酶的用量是0.02U‑0.16U/总反应体系，PEG8000的缓冲体系组分为110±5mM、pH＝7.5的Tris‑HCl，10±1mM MgCl2，10±1mM DTT和质量比5±1％的PEG8000。本发明还公开了所述试剂盒在DNA重组无缝克隆中的应用，实验证实本发明的试剂盒和相关的DNA组装方法与已经商业化的组装试剂具有等同的精确、高效和便捷的特点，但却比目前商业化试剂盒的售价低100倍，较现有方法更为经济和实用。

主权项

1.一种依赖T5核酸外切酶和PEG8000完成DNA组装的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒由T5核酸外切酶和含PEG8000的缓冲体系组成；以总体系为20uL计，T5核酸外切酶的用量是0.02U‑0.16U/总反应体系，PEG8000的缓冲体系组分为110±5mM、pH＝7.5的Tris‑HCl，10±1mM MgCl2，10±1mM DTT和质量比5±1％的PEG8000。