[发明专利]一类腺苷衍生物在人急性髓性白血病细胞中的应用

摘要

本发明提供了一类腺苷衍生物在人急性髓性白血病细胞中的应用，属于生物化学与分子生物学技术领域。本发明的数据建立在腺苷衍生物oTR、KR、BAR、iPR对人的9大瘤系60种肿瘤细胞系具有非常显著的体外增殖抑制活性，其中对白血病细胞株的药物敏感性最强的基础之上。

主权项

1.一类腺苷衍生物在人急性髓性白血病细胞中的应用，其特征在于，步骤如下：(1)细胞培养：将人急性白血病细胞株U937悬浮于含有灭活胎牛血清的无菌的DMED培养液中，置于浓度为5％CO2、相对湿度为90％、温度为37℃的培养箱中培养，细胞长至培养瓶底面积的70％～80％传代1次；(2)药物配制：oTR、KR、BAR、iPR均用0.1％DMSO溶解，继续用无菌DMEM培养基将溶解好的oTR、KR、BAR、iPR均稀释至浓度为0.1μM‑30μM，过滤除菌，室温保存；(3)处理细胞：将步骤(1)处于对数生长期的5×104～1×105个细胞接种于每孔含有1mlDMEM培养液的24孔板中，设置8组实验，第1组：空白对照组；第2组：10μMoTR组；第3组：10μM KR；第4组：10μM BAR；第5组：10μM iPR组；向各组中加入对应的药物，置于浓度为5％CO2、相对湿度为90％、温度为37℃的培养箱中孵育36小时，收集细胞；(4)检查分化指标：收集步骤(3)处理的细胞并用含0.2％FBS的PBS洗涤三次；将细胞与封闭抗体在室温下孵育15分钟，然后在4℃在黑暗中与抗人CD11b‑PE抗体温育30分钟后洗涤细胞，并通过流式细胞术分析；(5)检测细胞形态变化：收集步骤(3)处理的细胞并用含0.2％FBS的PBS洗涤三次；将载玻片用甲醇固定，并用赖特‑吉姆萨染色溶液染色20分钟，用蒸馏水漂洗，风干并使用显微镜观察。